英文名稱 Anti-ERGI3/ERGIC-3
中文名稱 內質網定位蛋白ERGI3抗體
別 名 2310015B14Rik; AV318804; C20orf47; CGI 54; D2Ucla1; dJ477O4.2; DKFZp547A2190; Endoplasmic reticulum Golgi intermediate compartment protein 3; endoplasmic reticulum localized protein ERp43; Endoplasmic reticulum-Golgi intermediate compartment protein 3; ERGI3_HUMAN; ERGIC and golgi 3; ergic3; ERV46; NY BR 84; PRO0989; RP23-220D12.2; RP3-477O4.1; SDBCAG84; serologically defined breast cancer antigen 84; Serologically defined breast cancer antigen NY BR 84; Serologically defined breast cancer antigen NY-BR-84.
產品名稱 | |
規格 | 0.2ml/200μg |
貨號 | YSRIBIO-017025 |
濃 度: 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物 信號轉導 轉運蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ERGI3/ERGIC-3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
抗體的熒光標記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發波長為492nm,發射光波長為525nm)共價結合。與FITC結合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產量(發射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯物的穩定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯抗體;
2.碳酸氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
茄病鐮刀菌(斜面)小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA Kit,48T/96T 小鼠骨鈣素(OT)ELISA Kit
小麥褐斑長蠕孢霉(不提供)大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA Kit,48T/96T 小鼠抵抗素(Resistin)
尖孢鐮刀菌黃瓜專化型(斜面)人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)小鼠催乳素(PRL)
尖鐮孢菌(斜面)小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)小鼠促腎上腺皮質激素(ACTH)
木蹄層孔菌(斜面)大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)小鼠促卵泡素(FSH)
禾谷鐮刀菌(斜面)兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA Kit,48T/96T小鼠β-內啡肽(Beta-Endorphin)
猴頭菌(北京猴頭)(斜面)人雌二受體(ER)ELISA Kit,48T/96T 小鼠腦鈉肽
細鏈格孢(斜面)小鼠雌二受體(ER)ELISA Kit,48T/96T 小鼠心鈉肽Pro-ANP(1-98)
葡萄殼小圓孢菌豬雌二受體(ER)ELISA Kit,48T/96T 小鼠大內皮素(BigET)
油菜菌核病菌(斜面)大鼠雌二受體(ER)ELISA Kit,48T/96T 小鼠內皮素1(ET-1)
芽枝孢霉人補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T 小鼠降鈣素(CT)
鏈格孢(斜面)小鼠補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T 小鼠可溶性破骨異化因子(sPANKL)
互隔交鏈孢霉(斜面)大鼠補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T 小鼠促狀腺素(TSH)
人參鏈格孢(斜面)兔子補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T 小鼠皮質(Cortisol)
球孢白僵菌(斜面)鮭魚補體蛋白4(C4)ELISA Kit,48T/96T 小鼠雌二(E2)
Anti-ERGI3/ERGIC-3抗體還原茚三酮二水合物(>98%,BR)γ氨丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體SDS溶(10%,pH7.2)
氫(>40%,BC)磷化糖原合酶激酶3β抗體SDS溶(20%,pH7.2)
中粘度羥纖維素磷化G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1抗體SDS溶(10%)
中粘度羥纖維素磷化珠蛋白轉錄因子1抗體SDS溶(10%)
IMDM培養磷化珠蛋白轉錄因子1抗體SDS溶(20%)
親和素樹脂G蛋白偶聯受體激酶相互作用蛋白1抗體STE緩沖(pH8.0)
生物素樹脂磷化GATA結合蛋白6抗體TEA溶(0.05mol/L)
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。