血磷濃度微量法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：糞便DNA分離試劑盒 50次
糞便細胞DNA分離試劑盒 50次
糞便細DNA分離試劑盒 50次
糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒 20次
糞便DNA分離＋高質(zhì)純化試劑盒 50次
石蠟切片DNA分離試劑盒 100次
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6794 |
商品介紹：
測定意義
血磷主要指血中的無機磷，以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切，在以mg/dL表示時，二者的乘積(［Ca］×［P］)為30～40。當(［Ca］×［P］)>40，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織；若(［Ca］×［P］)<35則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調(diào)節(jié)。
測定原理：
去除血清中有機磷后，無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被還原后呈藍色，在620nm有光吸收；通過測定620 nm吸光度，計算血液中磷含量。
自備儀器和用品：
離心機、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制： 市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集： 全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。
1-萘鹽酸鹽 AR磺氯吡 分析標準品Anti-p58ipk/FITC 熒光素標記p58ipk抗體IgG
1-萘鹽酸鹽 99%磺氯吡Anti-Phospho-p63 (Ser395) /FITC 熒光素標記化P63腫瘤抑制基因抗體IgG
核固紅 AR2,3-二氟苯甲 97%Anti-p70 S6 Kinase/P70 Beta1/FITC 熒光素標記p70S6Kb抗體IgG
核固紅 Biological stain2,3-二氟苯甲酸 98%Anti-P73 protein/FITC 熒光素標記P73腫瘤抑制基因抗體IgG
偏 AR惡霉靈 分析標準品，99.8%Anti-Phospho-p73 (Tyr99) /FITC 熒光素標記化P73腫瘤抑制基因抗體IgG
酚藏花紅 80%2-溴苯乙烯 97%,含0.1%對叔丁基鄰苯二酚(TBC)穩(wěn)定劑Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2/FITC 熒光素標記核糖體S6蛋白激β2抗體IgG
藍五號鈉鹽 80%5-乙酰酸鹽酸鹽 99%Anti-Phospho-p63 (Ser455)/FITC 熒光素標記化P63腫瘤抑制基因抗體IgG
四苯 99%土木香內(nèi)酯 分析標準品，≥97%(HPLC)Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標記化P63腫瘤抑制基因抗體IgG
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