參數規格：
產品名稱：伯氏疏螺旋體(BB)熒光-PCR法檢測試劑盒
產品分類：熒光-PCR法
貨號：CP99947
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
1047953-91-2 MALT1 inhibitor MI-2 100mg Diarrheagenic Escherichia coli致瀉性大腸桿菌（致瀉性大腸埃希氏菌）通用PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1047953-91-2 MALT1 inhibitor MI-2 10mg Diarrheagenic Escherichia coli致瀉性大腸桿菌（致瀉性大腸埃希氏菌）通用染料法熒光定量PCR試劑盒（停） 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1047953-91-2 MALT1 inhibitor MI-2 10mM*1mLinDMSO Diarrheagenic Escherichia coli致瀉性大腸桿菌（致瀉性大腸埃希氏菌）通用染料法熒光定量PCR試劑盒（停） 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1047953-91-2 MALT1 inhibitor MI-2 50mg Diarrheagenic Escherichia coli致瀉性大腸桿菌（致瀉性大腸埃希氏菌）通用PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
1047953-91-2 MALT1 inhibitor MI-2 5mg Diarrheagenic Escherichia coli致瀉性大腸桿菌（致瀉性大腸埃希氏菌）通用探針法熒光定量PCR試劑盒，停 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
異綠原酸B(標準品)Isochlorogenic acid B質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit 組織乙脫氫酶4活性比色法定量檢測試劑盒20
異甘草素（標準品）Isoliquiritigenin質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit人糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規格：96T/48T
人參皂苷Re(標準品)Ginsenoside Re質量規格：HPLC≥98%，標準品 人抗TNF-α自身抗體試劑盒 Human ai-TNF-alpha aoaibody ELISA kit 人腺苷酸環化酶1(AC-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人參皂苷F4,人參皂苷Rg4Ginsenoside F4質量規格：HPLC≥98%，標準品 RabbitvonWillebrandFactor,VWFELISAKit兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規格：96T/48T 豬口蹄疫抗體試劑盒 Pig Foot and Moh Disease Virus Aibody ELISA Kit
伯氏疏螺旋體(BB)熒光-PCR法檢測試劑盒tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5檸檬酸鈣；檸檬酸鈣四水質量規格：>98%,BRCalcium , tetrahydrate
CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸銫(分子生物學級)質量規格：>99.5%,分子生物學級Cesium sulfate
CM-M096小鼠表皮角質形成細胞*培養基100mL鉭試劑質量規格：AR N-Benzoyl-N-phenylhydroxylamine
A-375 [A375], 人惡性素瘤細胞株 瘤細胞,U-937細胞 NCI-N87(人胃癌細胞)左西孟旦質量規格：>99%,BRLevosimendan
小鼠原B細胞株;BaF3鋅試劑質量規格：ARZincon
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
