我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠小腸平滑肌細胞操作 | T25m2 | CS-963796 |
小鼠小腸平滑肌細胞【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養RatBone-specificAlkphaseB,ALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T 降氧化北美黃連堿 HPLC≥98% 20mg
Ratbradykinin,BK大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒規格:96T/48T 羥基癸烯酸 HPLC≥98% 20mg
RatBrainderivedneuroophicfacor,BDNF大鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 紫堇米定堿 HPLC≥98% 20mg
Ratbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 漏蘆甾酮 B HPLC≥98% 20mg
Ratbrainnaiureticpeptide,BNP大鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 白頭翁素 HPLC≥98% 20mg
RatBromodeoxyuridine,BrdU大鼠脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙?;?/span>beta乳香酸 HPLC≥98% 20mg
Ratcalcineurin,CaN大鼠鈣調0酸酶(CaN)ELISA試劑盒規格:96T/48T 滇藏五味子素G HPLC≥98% 20mg
RatCalcitonin,CT大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒規格:96T/48T 龍牙楤木皂甙VII HPLC≥97% 20mg
Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRP大鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T Beta茄邊堿 HPLC≥98% 20mg
Ratcalcium/calmodulin-dependeproteinkinase-Ⅱ,CAMK2大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 栝樓萜二醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISAkit 96T/48T 環磷酰胺(標準品) Cyclophosphamide 質量規格:HPLC>99%,標準品
人谷胱甘肽還原酶(GR)試劑盒 Human Glathione Reductase,GR ELISA Kit 醋酸地塞米松 Dexamethasone Acetate 質量規格:>98%,BP,BR,可用于細胞培養
RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規格:96T/48T 醋酸地塞米松(標準品) Dexamethasone Acetate 質量規格:HPLC>98%,標準品
ANNEXINV-FITC標記法細胞凋亡檢測試劑盒10/20 甲氧芐啶 Trimethoprim 質量規格:>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細胞培養
MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甲氧芐啶(標準品) Trimethoprim 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 ,英文名: PLGF ELISA Kit 西維來司鈉 Sivelestat 質量規格:含量大于98.5%
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISAkit 96T/48T 奈韋拉平 Nevirapine 質量規格:>99%,USP30,BR
人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 Human GSH-Px ELISA Kit 奈韋拉平(標準品) Nevirapine 質量規格:HPLC>98%,標準品
Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規格:96T/48T 磺胺甲惡唑 Sulfamethoxazole(SMZ) 質量規格:>99.5%,AR
APATHY封片液10毫升 磺胺甲惡唑(標準品) Sulfamethoxazole(SMZ) 質量規格:HPLC>99%,標準品
小鼠小腸平滑肌細胞操作S腺苷同型半胱氨酸(SAH或AdoHcy)酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20 羥基E賴百當烯酸 HPLC≥95% 20mg
Tacrolimus (FK506) ELISA Kit 人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒 羥基,脫氫醉椒素 HPLC≥95% 20mg
TAK1-TAB15微克 羥基,去氫柳杉酚 HPLC≥95% 20mg
tComplemefragme4a,C4aELISAKit大鼠過敏/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規格:96T/48T 羥基,二甲氧基紫檀烷;美迪紫檀素 HPLC≥98% 10mg
tComplemefragme4a,C4aELISA試劑盒大鼠過敏/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規格:96T/48T 羥基,二甲氧基黃烷酮 HPLC≥98% 20mg
TEM電鏡冰凍切片組織化學AP酶聯NBT/BCIP基礎檢測試劑盒(無一抗和二抗)50 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg
TEM電鏡冰凍切片組織化學AP酶聯NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)20 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg
TEM電鏡冰凍切片組織化學AP酶聯NBT/BCIP*間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg
TEM電鏡冰凍切片組織化學AP酶聯NBT/BCIP直接檢測試劑盒(含AP一抗)10 羥基,,羅漢松科三烯酸 HPLC≥98% 5mg
TEM電鏡冰凍切片組織化學HRP酶聯DAB基礎檢測試劑盒(無一抗和二抗)50 羥基,,,四甲氧基山山酮 HPLC≥98% 10mg
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。