成年小鼠心肌細胞【Mouse Cardiac: Normal Myocardial Cells】 產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 成年小鼠心肌細胞說明 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963815 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒 Rat Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 撲熱息痛/對乙酰氨基酚 Paracetamol(Acetaminofen polvo) 質量規格:>98.5%,BR
大鼠酪氨酸蛋白激酶JAK3(Jak3)試劑盒 Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit 撲熱息痛(標準品) Paracetamol(Acetaminofen polvo) 質量規格:HPLC>99%,標準品
大鼠酪氨酸羥化酶(TH)試劑盒 Rat Tyrosine Hydroxylase,TH ELISA Kit 奧拉帕尼 Olaparib,AZD2281,KU0059436 質量規格:≥98%,選擇性的PARP1/2抑制劑
大鼠類風濕因子(RF)試劑盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit 奎尼丁 Quinidine 質量規格:>98.0%,BR
大鼠類5α還原酶1(SRD5A1)試劑盒 Rat Steroid 5-Alpha-Reductase 1,SRD5A1 ELISA Kit 單甘油酯/甘油一酯 Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol 質量規格:單酯含量大于40%
大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA檢測試劑盒RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSF 96T/48T 甘油單油酸酯/單油酸甘油酯 Monoolein 質量規格:度≥50%,油狀液體
大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit ADP.Na2; 5'-二腺苷二鈉/腺苷-5'-二二鈉鹽 Adenosine-5'-diphosphate di salt(ADPna) 質量規格:>95.0%,BR
大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA檢測試劑盒RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSF 96T/48T ADP; 5'-二腺苷/腺苷-5'-二 Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP 質量規格:>95.0%,BR
大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit 沙格列汀/沙克列汀 Saxagliptin monohydrate 質量規格:>98%,BR,單水合物
大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒 Rat Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit 更昔洛韋 Ganciclovir 質量規格:>98.5%,BR,可用于細胞培養
rabbitHistamine,HISELISA試劑盒兔子組胺(HIS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 氫化奎寧定;雙氫奎尼丁 Hydroquinidine 質量規格:>95%
小鼠酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鹽酸依匹斯汀 Epinastine HCl 質量規格:>98%,BR
Rat hydroxyproline (Hyp) ELISA Kit 大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒 鹽酸依匹斯汀(標準品) Epinastine HCl 質量規格:>99%,標準品
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 依普利酮 Eplerenone 質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養
Humanbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA試劑盒人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規格:96T/48T 依普利酮(標準品) Eplerenone 質量規格:HPLC>98%,標準品
植物組織DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20 度酸 Etodolac 質量規格:>98.5%,BR
Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit人金葡菌腸(SE)ELISA試劑盒規格:96T/48T 度酸(標準品) Etodolac 質量規格:HPLC>98%,標準品
小鼠酸羧化酶(PC)ELISA試劑盒 ,英文名: PC ELISA Kit 孕烯 Etonogestrel 質量規格:>98%
人殺傷細胞凝集素樣受體(KLR)ELISA檢測試劑盒Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 96T/48T 依維莫司 Everolimus;RAD001 質量規格:>95%,mTOR抑制劑,BR
大鼠可溶性髓系細胞觸發受體-1(sEM-1)試劑盒 Rat soluble iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,sEM-1 ELISA Kit 醋酸氟輕松;醋酸膚輕松 Fluocinolone Acetonide 質量規格:>98%,BR
成年小鼠心肌細胞說明化人體RUNX3基因重組表達載體(pCMV5-RUNX3)10微克 匹伐他汀鈣(標準品) Pitavastatin Calcium /NK-104 質量規格:HPLC≥98.0% ,標準品
化人體RUNX3基因重組表達載體(pCMV5-RUNX3)測序引物對2OD 匹伐他汀鈣 Pitavastatin Calcium /NK-104 質量規格:≥98.0% 相關物質及對應異構體均小于1%
化人體RUNX3基因重組表達載體(pGEFP-RUNX3)10微克 匹多莫德(標準品) Pidotimod 質量規格:含量測定
化人體RUNX3基因重組表達載體(pGEFP-RUNX3)測序引物對2OD 匹多莫德 Pidotimod 質量規格:>99%,BR
化溶酶體功能中性紅檢測試劑盒20 啤酒甾醇 HPLC≥98% 5mg
化微粒體0脂酶D(PhospholipaseD)總活性比色法定量檢測試劑盒20 鈹試劑Ⅱ Beryllon II 質量規格:AR
化微粒體0脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測試劑盒20 芘(標準品) Pyrene 質量規格:分析標準品
化微粒體0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測試劑盒20 皮質甾酮/腎上腺酮 Corticosterone 質量規格:>97.0%
化微粒體0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測試劑盒20 皮質甾酮(標準品) Corticosterone 質量規格:HPLC>97.0%,標準品
化微粒體0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測試劑盒20 皮脂酸 HPLC≥98% 5mg
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。