注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
產品名稱 | 大鼠小腸平滑肌細胞直銷 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963873 |
大鼠小腸平滑肌細胞【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PorcineProgesterone,PROGELISA試劑盒豬孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甾,,(),四烯酮 HPLC≥98% 5mg
PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA試劑盒豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規格:96T/48T 甾,()二烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg
PorcineRelaxin,RLNELISA試劑盒豬松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒規格:96T/48T 麥珠子酸 HPLC≥98% 5mg
Porcine-glucosecoanspoer1,GSLT1ELISA試劑盒豬-葡萄糖共轉運載體1(GSLT1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 貓尾草異黃酮 HPLC≥98% 5mg
PorcinesolubleE-selectin,sE-selectinELISA試劑盒豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 貓眼草酚 D HPLC≥98% 5mg
PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 毛萼晶乙 HPLC≥98% 5mg
PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISA試劑盒豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 毛萼乙素 HPLC≥98% 5mg
Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑盒豬可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 毛果香茶菜醛 A HPLC≥98% 5mg
PorcinesolubleVascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISA試劑盒豬可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 毛喉帖 G HPLC≥98% 5mg
PorcineSomatostatin,SSELISA試劑盒豬生長抑素(SS)ELISA試劑盒規格:96T/48T 毛喉帖 J HPLC≥98% 5mg
動物脂肪組織細胞分離培養試劑盒10 皮質甾酮/腎上腺酮 Corticosterone 質量規格:>97.0%
RatvonWillebrandFactor,vWFELISA試劑盒大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 皮質甾酮(標準品) Corticosterone 質量規格:HPLC>97.0%,標準品
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 ,英文名: Hsp-40 ELISA Kit 二硫化四乙基秋蘭姆 Disulfiram 質量規格:>97%
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA檢測試劑盒MouseprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T 雙硫侖(標準品) Disulfiram 質量規格:HPLC>99%,標準品
人鈣聯蛋白(calnexin)試劑盒 Human calnexin ELISA Kit 楊梅素/楊梅酮 Myricetin 質量規格:HPLC>95.0%,BR
RatIerferonγ,IFN-γELISAKit大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 楊梅素/楊梅酮(標準品) Myricetin 質量規格:HPLC>98.0%,標準品
PASE-1蛋白共沉淀分析試劑盒5 去氧膽酸 Deoxycholic acid 質量規格:>95.0%
Mouselipoproteinα,Lp-αELISA試劑盒小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T β-環糊精 β-Cyclodextrin 質量規格:>98.5%,藥用級
小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP-27 ELISA Kit 雷米普利 Ramipril 質量規格:>98.0,BR
小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA檢測試劑盒Mouseoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T 雷米普利(標準品) Ramipril 質量規格:HPLC>98,標準品
大鼠小腸平滑肌細胞直銷大鼠腎上腺髓質素(AM)基因重組表達載體(pcDNA-AM)感受態菌DH-5α1毫升 麥冬皂苷B HPLC≥98% 5mg
大鼠腎上腺髓質素(AM)基因重組表達載體(pCMV5-AM)感受態菌DH-5α1毫升 麥冬皂苷A HPLC≥98% 10mg
大鼠腎上腺髓質素(AM)基因重組表達載體(pGEFP-AM)感受態菌DH-5α1毫升 麥冬內酯A HPLC≥98% 20mg
大鼠腎上腺髓質素基因引物對2OD 麥冬黃烷酮A HPLC≥98% 10mg
大鼠腎上腺總RNA20微克 麥冬苷元OαL吡喃鼠李糖基(→)βD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
大鼠腎素(Renin)ELISA檢測試劑盒RaeninELISAKit 96T/48T 麥迪霉素(標準品) Midecamycin 質量規格:效價測定
大鼠腎素(Renin)試劑盒 Rat Renin ELISA Kit 麥迪霉素 Midecamycin 質量規格:美國進口
大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒RatKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T 買麻藤醇 GC≥97% 20mg
大鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒 Rat Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit 嗎替麥考酚酯-d4 Mycophenolate Mofetil-d4 質量規格:美國進口
大鼠腎腫瘤抗原(RAGE)試劑盒 Rat renal tumor aigen,RAGE ELISA kit 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標準品) Mycophenolate Mofetil 質量規格:HPLC>98%,標準品