參數規格:
產品名稱:通用型蛋白酶抑制劑混合液,100X
產品貨號:YS-P013262
產品規格: 1 mL
產品分類:PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
人Rho關聯卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)鹽酸因(標準品)肌側索硬化癥相關蛋白2(2號染色體)抗體
人Rho家族GTP酶1(RND1)嗎啉惡酮(雷奈佐利, 利奈唑,利奈唑烷,利奈唑 )三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體
人Runt相關轉錄因子2(RUNX2)嗎啉惡酮(標準品)β淀粉樣蛋白前體結合蛋白B-1抗體
人IX型膠原α3 (COL9α3)賴諾普利內收蛋白a1抗體
人S100蛋白(S-100)賴諾普利(標準品)α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體
人Salusin α蛋白(Salusin α) 鹽酸洛貝林膜粘連蛋白7抗體
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)氯尼達明早老素γ分泌酶抗體
人音猬因子(SHH )洛匹那韋鈉ATP酶蛋白a1抗體
人Slit同源物2(Slit2)洛匹那韋(標準品)Rho鳥苷酸交換因子2抗體
人Smad同源物1 (Smad1/MADH1) 氯雷他定磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體
人Smad同源物4 (Smad4/MADH4) 氯雷他定(標準品)去整合素樣金屬蛋白酶9抗體
人Smad同源物7 (Smad7/MADH7) 褪黑素,松果體素艾滋病病制約錨定蛋白抗體
人Sp100核抗原(Sp100) 褪黑素,松果體素(標準品)腺苷酸環化酶1抗體
人STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)美法核糖核酸酶L抑制蛋白抗體
人STAT蛋白抑制因子3(PIAS3) 美法標準品)Rho GTP酶激活蛋白24抗體
人原鈣黏素β16(PCDHβ16) 鹽酸米諾環素,美滿霉素;二四環素鹽酸鹽GTP酶激活蛋白ASAP3抗體
通用型蛋白酶抑制劑混合液,100XCaspase-12 半胱酸蛋白酶蛋白-12抗體N-甲基-3-吲哚乙酸 97%
Caspase-12 半胱酸蛋白酶蛋白-12抗體4-甲基庚烷 99%
Caspase-13/4 半胱酸蛋白酶蛋白-13抗體甲基環己酮 98%
Caspase-3(Active) 活化半胱酸蛋白酶蛋白-3抗體4-甲基-3- 98%
caspase-3 p12 subunit 活化半胱酸蛋白酶蛋白-3抗體(-)2,2′-亞甲基雙(3α,8α-二氫-8H-茚并[1,2--d]噁唑 98%
procaspase 3 半胱天冬酶-3酶原抗體2,2′-亞甲基雙[(4,s)-4-苯基-2-噁唑啉] 97%
Caspase 4 半胱酸蛋白酶蛋白-4抗體2,2′-亞甲基雙[(4,s)-4-叔丁基-2-噁唑啉] 99%
Caspase-6 (CT) 半胱酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)氮芥鹽酸鹽 98%
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。