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  • H固體培養(yǎng)基粉劑說明書

H固體培養(yǎng)基粉劑說明書

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  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-09-08
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9975
  • 人氣值244138
產(chǎn)品標(biāo)簽

H固體培養(yǎng)基粉劑

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上海邦景實業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海邦景實業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!


公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。





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產(chǎn)地國產(chǎn) 加工定制 適用領(lǐng)域科研
貨號BJ-01R3330
H固體培養(yǎng)基粉劑說明書的公司*:
CA8 碳酸酐相關(guān)蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2mlGAPDH 3-磷酸甘油醛脫(兔來源免疫組化用抗體) 規(guī)格: 0.1mlHAGHL 羥基酰肽水解樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMAL MAL蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-P53(Thr55) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml
H固體培養(yǎng)基粉劑說明書 產(chǎn)品詳情

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)     轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

公司產(chǎn)品具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱:H固體培養(yǎng)基粉劑說明書

貨號:BJ-01R3330

規(guī)格:1L

分類:培養(yǎng)基

儲存條件:室溫,24個月

用途:細(xì)菌培養(yǎng)

注意事項:主要由胰蛋白胨、氯化鈉、瓊脂等組成。如要求無菌,可高壓滅菌15~21min。

注意事項:

1、盡注意無菌操作,避免污染。

2、避免反復(fù)凍融。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:

1.直接配制法    對于純凈的物質(zhì)(稱做基準(zhǔn)物質(zhì))可準(zhǔn)確進(jìn)行稱量,用蒸餾水溶解后,轉(zhuǎn)移到一定容積的容量瓶中稀釋至標(biāo)線,溶液的準(zhǔn)確濃度可以直接計算出來。溶質(zhì)的純度、性質(zhì)等對濃度有較大影響,為此,對用來直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液用的基準(zhǔn)物質(zhì)必須具備以下條件:

(1)物質(zhì)的純度要高,含量不得低于99.9%,雜質(zhì)的含量應(yīng)當(dāng)少到可以忽略的程度。

(2)物質(zhì)的分子組成應(yīng)與其化學(xué)式*符合,包括結(jié)水合物中的結(jié)品水含量也必須與其化學(xué)式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性質(zhì)穩(wěn)定,貯蔵時應(yīng)不發(fā)生變化,不易吸收空氣中的水分、二氧化碳等氣體而改變其成分,不易風(fēng)化潮解和被空氣氧化,烘干時不易分解等。此外最好使用分子量較大的基準(zhǔn)物質(zhì)以減小稱量誤差。

2.間接配制法    凡不符合基準(zhǔn)物質(zhì)條件的物質(zhì),可先配制成近似所需濃度的溶液,再用基準(zhǔn)物質(zhì)溶液或能與其發(fā)生定量反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定,求其準(zhǔn)確濃度,這種通過滴定來確定準(zhǔn)確濃度的操作叫做“標(biāo)定”。間接法配制近似濃度溶液時不需用分析天平稱量和容量瓶配制,可用臺秤、量筒等器皿。將稱好的物質(zhì)轉(zhuǎn)移到干凈的試劑瓶中,先加少量蒸餾水將其溶解,繼續(xù)用量筒加蒸餾水至需要量即可。由于大多數(shù)試劑不符合基準(zhǔn)物的條件,故間接法配制標(biāo)準(zhǔn)溶液是經(jīng)常的。如固體NaOH因易吸收空氣中的水分而潮解和吸收CO2使表面變質(zhì);濃鹽酸因易揮發(fā)而無法準(zhǔn)確稱量;不易得到分析純級的試劑等,這些物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液須用間接法來配制,經(jīng)標(biāo)定后再做標(biāo)準(zhǔn)溶液使用。

2.png 

標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定:

1.用基準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定法

(1)多次稱量法    用減重法精密稱取幾份(如2~3份)基準(zhǔn)物質(zhì),分別倒入編號的干凈錐形瓶(或燒杯)內(nèi),各加少量蒸餾水溶解,再加指示劑后分別用待標(biāo)定溶液滴定至等當(dāng)點,各自記錄所消耗待標(biāo)定溶液的體積,結(jié)合基準(zhǔn)物質(zhì)的重量分別算出溶液的準(zhǔn)確濃度,最后取平均值做為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。

(2)移液管法    精密稱取一份基準(zhǔn)物質(zhì),在干凈的小燒杯內(nèi)加少量蒸餾水溶解,順玻棒全部轉(zhuǎn)移到已校正好的容量瓶中,多次沖洗燒杯洗液并入容量瓶中,最后配成一定體積的溶液,混勻。每次滴定用配套的移液管吸取并轉(zhuǎn)移至錐形瓶中,加指示劑后用待標(biāo)定溶液滴定至等當(dāng)點,每次做好記錄,根據(jù)所消耗待標(biāo)定溶液的體積,結(jié)合基準(zhǔn)物質(zhì)的重量,分別算出溶液的準(zhǔn)確濃度取平均值做為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。

2.比較法標(biāo)定    如果待標(biāo)定溶液能與某標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行反應(yīng),可吸量一定體積的某標(biāo)準(zhǔn)溶液,用待標(biāo)定溶液滴定,或吸量一定體積的待標(biāo)定溶液,用某標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。根據(jù)兩溶液所消耗的毫升數(shù)及某標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,按N1V1=N2V2式可以計算出待標(biāo)定溶液的準(zhǔn)確濃度。這種用標(biāo)準(zhǔn)落液來測定待標(biāo)定溶液準(zhǔn)確濃度的過程稱為“比較法”標(biāo)定。如果某標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度由于某些原因不夠準(zhǔn)確時,就會直接影響待標(biāo)定溶液濃度的準(zhǔn)確性,顯然比較法不如用基準(zhǔn)物質(zhì)直接標(biāo)定的方法精確,但比較法簡便易行。

標(biāo)定完畢,蓋緊標(biāo)準(zhǔn)溶液試劑瓶塞,瓶簽上注明標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱、準(zhǔn)確濃度和日期等。

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H固體培養(yǎng)基粉劑說明書JC-1熒光探針1mg

JC-10熒光探針(線粒體膜電位熒光探針)1mg

碘化丙啶(PI)Propidium iodide1ml

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碘化丙啶染液(1mg/ml)Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml)1ml

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羅丹明123Rhodamine 1235mg

細(xì)胞膜紅色熒光探針DiI10mg

 


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