實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
嗜冷黃桿菌PCR熒光定量檢測試劑盒 | Flavobacterium psychrophilumPCR | 多種規格 | BJ-P6757 |
特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 ４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
胰酪大豆胨液體培養基（TSB）（2015藥典） TSB 250g 1.56-100 ng/mL 人DNA拓撲異構1(DNA topoisomerase 1)ELISA試劑盒
營養肉湯培養基（中國藥典） 250g 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human UPF0556 protein C19orf10
3%氯化鈉MR-VP培養基 3% NaCl MR-VP Medium 20支炭疽桿菌沉淀血清進口、國產炭疽桿菌檢測用配套試劑1ml
3%氯化鈉堿性蛋白胨水顆粒 3%NaCl Alkaline Peptone Water 225ml/袋*10 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 114
1瓶 Bel-7404株 Bel-7404 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Cytochrome c oxidase subunit 5A, mitochondrial
2 ug pcDNA3.1/Zeo（+） pcDNA3.1/Zeo（+） 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Endoplasmin
1瓶 EC-304株 EC-304 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human DNA ligase 3
煌綠瓊脂培養基 Brilliant Green Agar Medium 250g 0.312-20 ng/mL 人水通道蛋白9(AQP9)ELISA試劑盒
1瓶 CNE株 CNE 低溫運輸和保存KORSER氏檸檬酸鹽肉湯進口、國產Korser Citrate Sodium Broth100克用于細菌的枸櫞酸鹽試驗
2 ug pLOX-CW-CRE pLOX-CW-CRE 低溫運輸，-20℃保存 0.625-40 ng/mL 人硫酸乙酰肝素蛋白聚糖/串珠素(HSPG)ELISA試劑盒
250mg 直鏈淀粉 Amylose 室溫干燥保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Histone H4
嗜冷黃桿菌PCR熒光定量檢測試劑盒紫草素標準品分子式： C16H16O5英文名： shikonin分子量： 288.31號： 517-88-4檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
紫草酸標準品分子式： C27H22O12英文名： Lithospermic acid分子量： 538.46號： 28831-65-4檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
紫丁香苷標準品分子式： C17H24O9英文名： Syringin分子量： 372.37號： 118-34-3檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
紫堇靈標準品分子式： C21H21NO5英文名： Corynoline分子量： 367.40號： 18797-79-0檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
紫萁酮標準品分子式： C10H10O3英文名： Osmundacetone分子量： 178號： 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
紫菀酮標準品分子式：C30H50O英文名：Shionone分子量：426.72號：10376-48-4檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
紫云英苷標準品分子式：C21H20O11英文名：Astragalin分子量：448.38 號：480-10-4 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
醉魚草皂苷 Ⅳ標準品分子式： C48H78O18英文名： buddlejasaponin IV分子量： 942號： 檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：20mg 50mg 100mg 500mg 1g (可根據客戶需求包裝)
蛇床子素標準品分子式： C15H16O3英文名： Osthole分子量： 244.29號： 484-12-8檢測方式：高效液相色譜法HPLC≥98%規格：1kg 5kg (可根據客戶需求包裝)
