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DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法

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  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-04-11
  • 廠商性質經銷商
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  • 產品數量9987
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貨號FS-01S63278
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產品名稱:DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法

規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63278
商品介紹:

測定意義

AsA作為植物細胞一個重要生理指標,其AsA 的含量、氧化還原狀態(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關酶類活性的變化涉及植物對一系列環境脅迫的響應。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物體內,與抗壞血酸共同組成氧化還原系統,具有電子受體的作用。

測定原理:

DTT還原DHA生成AsA,通過測定體系中AsA的生成速率,即可計算出DHA含量。

自備儀器和用品:

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

胸苷激1熒光Cy3標記豬IgGThymidine Kinase 1

N-6-腺特異性DNA甲基轉移1熒光Cy3標記水貂IgGN-6-Adenine Specific DNA Methyltransferase 1

抗壞血過氧化物熒光Cy3標記兔IgMAscorbate peroxidase

β-1,3-葡聚糖熒光Cy3標記大鼠IgMβ-1,3 glucanase

丁型肝炎IgM抗體熒光Cy3標記重組白介-1受體拮抗劑Hepatitis D virus IgM

白細胞介36α熒光Cy3標記血藍蛋白Interleukin 36α

白細胞介36β熒光Cy3標記雞卵白蛋白Interleukin 36β

血管內皮生長因子受體2熒光Cy3標記血白蛋白Vascular endothelial cell growth factor receptor 2

肌漿;內質網鈣ATP熒光Cy3標記胰糜蛋白SERCA ATPase

細胞色P4503A4Alexa Fluor 555標記羊IgG(流式同型對照)Cytochrome P4503A4

糖基轉移Alexa Fluor 555標記大鼠IgG(流式同型對照)Glycosyl Transferases

腦啡肽熒光PE-Cy7標記兔IgG(流式同型對照)enkephalin

抗肌炎抗體譜3抗體IgG辣根過氧化物標記生物MSA3-IgG antibody

心型脂肪結合蛋白(親和純化) 牛IgGheart fatty acid binding protein

半胱蛋白抑制劑;胱抑C熒光標記牛血清白蛋白Cystatin C
DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法 分析標準品(R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-聯膦基)二茂鐵乙 97%Anti-EXPB-2/FITC  熒光標記植物延展-βIgG

BP2007,藥用級(1R,2R)-二[(2-甲氧基基)基磷]乙烷 97%Anti-Ezrin/Radixin/FITC  熒光標記埃茲蛋白抗體IgG

葡聚糖40 分子量40000(R)-(+)-2,2'-聯[二-(4-基)膦基]-1,1'-聯萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG

5'-腺核苷二鈉鹽 99%(R)-(+)-2,2'-二(二-3,5-基膦)-1,1'-聯萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG

腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%rac-2-(二叔丁基膦)-1,1′-聯萘  98%Anti-Fabp2 /FITC  熒光標記脂肪結合蛋白2抗體IgG

腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%,用于培養(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二基膦基)二茂鐵基]乙 98%Anti-FABP(brain)/FITC  熒光標記腦型脂肪結合蛋白抗體IgG

核苷5’-一磷腺苷鈉鹽 99%(R)-(+)-2-[2-(二基膦)基]-4-異基二惡唑 98%Anti-factor V/FITC  熒光標記5抗體IgG

抑肽 3-8 TIU/mg(R)-(+)-1,1'-(二基膦基)烷 98%Anti-factor VIII/FITC  熒光標記第八因子相關抗原抗體IgG

 


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