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Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶

參考價(jià)
1170.00-7020.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
規(guī)格
  • 500U 1170.00元15 盒可售
  • 5000U7020.00元15 盒可售
  • 型號(hào)
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2024-06-27
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限8
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9976
  • 人氣值246444
產(chǎn)品標(biāo)簽

Ribonuclease R(Rnase R)核酸外切酶

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貨號(hào)BJ-PJ6693 規(guī)格500U、5000U 包裝
用途僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
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Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶 產(chǎn)品詳情

Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶

商品屬性:

產(chǎn)品分類

規(guī)格

貨號(hào)

核酸酶系列

500U

BJ-PJ6693

核酸酶系列

5000U

BJ-PJ6693

Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶 

商品介紹:

RNase R 來源于 E.coli,通過基因工程重組表達(dá),該酶為 Mg2+依賴的 3’-5’核糖核酸外切酶。其可消化所有線性 RNAs 底物,但不能消化環(huán)狀 RNA(circular RNA)、套索 RNA(lariat RNA)、雙鏈 RNA、3’突出端<7nt 的雙鏈RNA。本酶可高效的去除不含二級(jí)結(jié)構(gòu)的線性 RNA,從而純化獲得環(huán) RNA 分子,用于后續(xù) RNA-sequencing 等實(shí)驗(yàn)。
Ribonuclease R(Rnase R) 核酸外切酶
活性定義:在 20 mM Tris-HCl(pH7.5),100 mM KCl,0.5mM Mg2+條件下, 37°C 下水解 1 μg 的 poly-r(A)產(chǎn)物,所需酶量為 1 個(gè)活性單位。10xRNase R Buffer:200 mM Tris-HCl, 1 M KCl,5 mM
MgCl2,pH7.5
酶儲(chǔ)存液:20 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 1 mM DTT ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Tween-20, pH 7.5。
儲(chǔ)存:置于-20°C 可保存 3 年,避免反復(fù)凍融。
使用方法
1. 配制反應(yīng)體系
RNA 1-10 μg
10xRNase R Buffer 2.5 μl
Rnase Inhibitor (40 U/μl) 0.5 μl
RNase R (20 U/μl) 1-2 μl
DEPC-treated Water up to 25 μl
2. 37℃孵育 30-60min,反應(yīng)完畢后可加入 5 mM EDTA終止反應(yīng)。
使用注意事項(xiàng):
(1) 在 total RNA 的消化中,由于含有二級(jí)結(jié)構(gòu)較多的RNA,如 tRNA、rRNA、dsRNA 等,RNase R 對(duì)該類底物消化活性大幅下降,此時(shí)需要延長消化時(shí)間至 2h,并在 1h 時(shí)補(bǔ)加 RNase R 進(jìn)行消化。必要時(shí)將反應(yīng)溫度提高至 45℃,以打開含有二級(jí)結(jié)構(gòu)的 RNA 分子。
(2) 對(duì)于含有 highly structured 的 RNAs,RNase R 仍然無法消化, 稍后將推出 5’-3’的核糖核酸外切酶以解決此類問題。
(3) 據(jù)其它文獻(xiàn)報(bào)道,在含有 highly structured 的 RNAs,可放大反應(yīng)體積至 50 μl,可降低二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響,從而促進(jìn) RNA 的降解。
(4) 高溫和長時(shí)間的孵育,可能導(dǎo)致 RNA 的非酶性斷裂(水分子的 H+對(duì)二酯鍵的攻擊)。因此,消化時(shí)間、反應(yīng)溫度均需要根據(jù)特定的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化和調(diào)整。

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