Gibson無縫克隆試劑盒
商品屬性：
產品分類 | 規格 | 貨號 |
克隆相關 | 10T | BJ-PJ6643 |
克隆相關 | 50T | BJ-PJ6643 |
商品介紹：
Gibson 無縫連接試劑盒是一種混合酶系統，其可將任意方法線性化的載體和與其兩端具有重疊區域的一個或多個 PCR 片段定向重組連接。該方法不依賴于 T4 DNA 連接酶，不受載體和目的片段的酶切位點限制，可在 30 分鐘內實現 PCR 片段高效定向無縫克隆至載體的任意位置，從而獲得完整的雙鏈 DNA 分子。該試劑盒使用簡單，只需加入合適比例的載體和 PCR 片段在室溫孵育 15-30min 即可完成片段的連接。
原理
T5 外切酶可從雙鏈 DNA5'端切割形成 3'突出末端， 從而促進重疊區域的具有互補序列的片段進行退火。高保真 DNA 聚合酶可使退火的片段向 3'端延伸，從而填補片段缺口。Taq DNA 連接酶可封閉缺刻從而獲得完整的雙鏈 DNA 分子。
優勢
1. 室溫孵育即可完成片段的連接,無需 50℃。
2. 不受載體或插入片段酶切位點限制在任意位置進行無縫克隆
3. 不依賴于 T4 連接酶，高效連接，無堿基缺失
4. 可同時高效連接一個或多個 PCR 片段
5. 無需額外的亞克隆，菌檢陽性率高達 95%
組分
保存
-20℃可保存 2 年，-80℃可保存 5 年，避免反復凍融。
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