ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
甲胎蛋白撫生ELISA試劑盒 | Alpha-fetoprotein | FS-P65386 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
三磷肌苷焦磷酶抗體產品別名: 6-溴-2--1,8-萘啶塔拉薩敏;塔拉烏頭(標準品)
吲哚2,3-雙加氧酶抗體產品別名: 5-溴-3-吲哚苔黑酚龍膽二糖苷
白介素19抗體產品別名: 3-氟-4-磺酰苔黑酚葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷(標準品)
抑制素A/Inhibin α抗體產品別名: 2-氟-6-甲太子參(標準品)
胰島素因增強結合蛋白1/2抗體產品別名: 8-溴-7-羥喹啉太子參環肽B(標準品)
磷化白介素-1受體相關激酶1抗體產品別名: 2-溴-5-甲檀香(標準品)
磷化白介素-1受體相關激酶1抗體產品別名: 蛋白銀唐古特大黃(標準品)
磷化白介素-1受體相關激酶1抗體產品別名: 2,6-二溴桃金娘根(標準品)
干擾素調節因子3產品別名: 6-甲吡啶-2-氨叔丁酯桃仁(標準品)
磷化干擾素調節因子3產品別名: 藻酯桃仁(山桃)(標準品)
干擾素調節因子7抗體產品別名: 5-溴-2-甲桃葉干浸膏(標準品)
磷化干擾素調節因子7抗體產品別名: 淀粉酶(米曲霉)桃葉珊瑚苷(標準品)
磷化胰島素受體底物-1抗體產品別名: 聚烯銨桃枝(標準品)
磷化胰島素受體底物-1抗體產品別名: 聚烯特女貞苷(標準品)
磷化胰島素受體底物-1抗體產品別名: 淀粉酶(米曲霉)藤合歡(南蛇藤果)(標準品)
甲胎蛋白撫生ELISA試劑盒Human JUN(Transcription factor AP-1) ELISA Kit異常威克漢姆酵母拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KIT石面單胞菌屬拉丁屬名: Epilithonimonas lactis
Human COQ3 (Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase, mitochondrial) ELISA KIT野野村氏菌屬拉丁屬名: Nonomuraea endophytica sp
Human RBBP4 (Histone-binding protein RBBP4) ELISA KIT谷氨棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
Human HN1L (Hematological and neurological expressed 1-like protein) ELISA KIT堆肥鞘氨桿菌拉丁屬名: Sphingobacterium composti甲胺喋呤ELISA試劑盒免費包郵
Human OTX1 (Homeobox protein OTX1) ELISA KIT堅強芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus firmus
Human HCST (Hematopoietic cell signal transducer) ELISA KIT根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human HORMAD2 (HORMA domain-containing protein 2) ELISA KIT蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis Berliner
Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human GADD45G (Growth arrest and DNA damage-inducible protein GADD45 gamma) ELISA KIT三葉草根瘤菌用途: 與三葉草共生固氮
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準