ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！
產品名稱 | E人雌激素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human estrogen, E Elisa Kit |
貨號 | FS-H63632 |
公司“質量是企業是生命之源”，選購優勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Microvirga│sp. 微枝形桿菌屬Microvirga│sp.分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0014生長條件:37C存儲條件:-80℃冰箱凍結；真空冷凍干燥 純度：99%
chaetomium│gracile 細麗毛殼chaetomium│gracile分離基物:土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:noCM0014生長條件:26C存儲條件:-80℃冰箱凍結；真空冷凍干燥 純度：95%
Micromonospora│sp. 單孢菌屬Micromonospora│sp.分離基物:土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:no活性物質；抗銅綠假單孢菌CM0038生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結 純度：95%
Pseudonocardia│xinjiangensis 新疆假諾卡氏菌Pseudonocardia│xinjiangensis凍干物安全等級:1模式菌株:CM0027生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度：97%
Neosartorya│sp. 新薩托菌屬Neosartorya│sp.分離基物:土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:no活性物質；抗炎CM0014生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結 純度：97%
Chaetomium│bostrychodes 旋絲毛殼Chaetomium│bostrychodes分離基物:土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:noCM0014生長條件:26C存儲條件:-80℃冰箱凍結；真空冷凍干燥 純度：≥99%
Streptomyces│lavenducolor 薰衣草色鏈霉菌Streptomyces│lavenducolor分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0039生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度：≥98%
Cladosporium│sp. 芽枝霉屬Cladosporium│sp.分離基物:土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:no活性物質，次核苷脫氫酶抑制活性CM0018生長條件:26C存儲條件:-80℃冰箱凍結；礦物油法；定期移植法 純度：≥98%
E人雌激素ELISA試劑盒實驗原理Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體灰黃霉素5-溴戊Human sTNF-1 (Soluble Tumor Necrosis Factor 1) ELISA Kit
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體頭孢拉定5-溴戊Human MITF (Microphthalmia Associated Tranion Factor) ELISA Kit
LAG-3/CD223 淋巴活化基因-3抗體頭孢雜質A5-溴戊Human BMP-5 (Bone Morphogenetic Protein 5) ELISA Kit
Langerin/CD207 白分化抗原CD207抗體克拉維鹽苯甲脒，水合物Human sTfR1 (Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit
LAP18/Stathmin 白血病相關蛋白18/癌蛋白18抗體舒巴坦鹽苯甲脒，水合物Human IL-12 p35 (Interleukin 12 p35) ELISA Kit
Phospho-Stathmin (Ser16) 磷化原癌基因蛋白18頭孢羥氨芐鹽苯甲脒，水合物Human IL-25 (Interleukin 25) ELISA Kit
Phospho-Stathmin (Ser38) 磷化原癌基因蛋白18林可霉素尿素-15N2Human VacA (Vacuolating Cytotoxin A) ELISA Kit
LAT/LAT1 T活化連接蛋白抗體甲砜霉素尿素-15N2Human IL-34 (Interleukin 34) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
