實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 | 貨號 |
豬痘病毒PCR熒光定量檢測試劑盒 | Swine Poxvirus(SWPV)PCR | 多種規格 | BJ-P7369 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。 3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。 6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Fructus sophorae槐角染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周SKA1 紡錘體和著絲粒相關蛋白1抗體 規格: 0.2mlUACA 葡萄膜自身抗原Uaca抗體 規格: 0.2ml
Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒C型LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MAP3K8/TPL2 絲裂原活化蛋白激激8抗體 規格: 0.2mlPRMT5 組蛋白甲基轉移5抗體 規格: 0.2ml
Human Herpesvirus-8(HHV-8)人皰疹病毒8型探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RASSF6 RAS家族關聯結構域蛋白6抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgG 規格: 0.1ml
Cortex acanthopanacis五加皮探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IRAK1 白介素-1受體相關激1抗體 規格: 0.1mlRAB38 G蛋白結合蛋白RAB38抗體 規格: 0.2ml
Piscirickettsia salmonis鮭魚立克次氏體LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ASBT/SLC10A2 頂膜鈉依賴性膽鹽轉運體蛋白抗體 規格: 0.2mlSSB/La 干燥癥SSB/La抗體 規格: 0.2ml
Nematodirus helvetianus微黃線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CLASP2 細胞連接相關蛋白2抗體 規格: 0.2mlMSH Alpha 促黑細胞激素α抗體 規格: 0.1ml
Eikenella corrodens嚙蝕艾肯染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TrK A/NTRK1 酪激A抗體 規格: 0.1mlphospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 0.1ml
Cochliomyia hominivorax嗜人錐蠅LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周C10orf63/Enkurin 10號染色體開放閱讀框63抗體 規格: 0.2mlPXR 孤兒核受體PAR1抗體 規格: 0.2ml
Brucella bovis牛布魯氏桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ROC1/RNF75 環指蛋白75抗體 規格: 0.2mlSTIM1 基質交分子1抗體 規格: 0.2ml
Folium mori桑葉LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DEDD2 死亡效應結構域蛋白2抗體 規格: 0.2mlMidkine 中期因子/肝素結合生因子抗體 規格: 0.1ml
豬痘病毒PCR熒光定量檢測試劑盒CRHR1/CRFR1 促上皮質釋放激素受體1抗體 規格: 0.1ml
GLUT5 葡萄糖轉運蛋白5抗體 規格: 0.1ml
大鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA KitELISA.96T/48T大鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA Kit ELISA. 96T/48T
LAP3 亮氨基肽3抗體 規格: 0.2mlNDUFA9 NDUFA9蛋白抗體 規格: 0.2ml
C16orf61 16號染色體開放閱讀框61抗體 規格: 0.2ml
MTM1/Myotubularin 肌微管素1抗體 規格: 0.2ml
fatty acid elongase 脂肪酸延抗體 規格: 1ml
Leptin receptor/Ob-R 瘦素受體抗體 規格: 0.1ml
中文名稱方法規格中文名稱方法規格
Phospho-PLC beta3 (Ser537) 磷酸化磷酯Cβ3抗體 規格: 0.1ml
HDGF 肝衍生生因子抗體(高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體) 規格: 0.2ml