操作步驟:
(1) 細胞系培養：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液，37℃ CO2培養密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液：用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
商品介紹：
產品名稱 | 倉鼠腎成纖維細胞；BHK | 貨號 | AXB10138 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | BHK |
分類 | 倉鼠細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品：
大鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 ，英文名： M2-PK ELISA Kit
Mouse alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78) 48T/96T 進口分裝
CLIAKitforKLK11(HumanKallikrein11)ELISAKit人釋放酶11規格：48T/96T
通用型腸桿菌(EerobacteriaceaSTX2)試劑盒20次
小鼠免疫球蛋白G3(IgG3)ELISA試劑盒 ，英文名： IgG3 ELISA Kit
人抗滋養膜細胞抗體(ATA)ELISA檢測試劑盒Humanai-ophoblastaibody,ATAELISAKit 96T/48T
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒 Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
英文名稱Human14-3-3proteinELISAKit人14-3-3蛋白(14-3-3pro)規格：96T/48T
糞便細菌DNA分
兔白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒
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HumanlisteriolysinELISAKit 人單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanglycophosphatidylinositol,GPIELISA試劑盒人糖0脂酰肌醇(GPI)ELISA試劑盒規格：96T/48T
組織蛋白巰
倉鼠腎成纖維細胞；BHK小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒
Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠K1(VK1)ELISA試劑盒
Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancommonacelymphocyticleukaemiaaigen,CALLAELISA試劑盒人普通急性淋巴細胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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