2XRAPA3G全能PCR Mix
商品屬性：
產品分類 | 規格 | 貨號 |
PCR相關 | 1ml | BJ-PJ6588 |
PCR相關 | 10ml | BJ-PJ6588 |
商品介紹：
| RAPA3G DNA聚合酶為經電子重構架的第三代Taq DNA聚合酶，第三代DNA聚合酶具有高度的雜質耐受性、長片段擴增能力、高擴增成功率、高產量等特征，從而使得RAPA3G系列產品可用于粗制樣品的直接擴增，無需核酸純化步驟。雜質耐受性方面，該酶可耐受植物中的多糖多酚；全血、血清、血漿中的肝素、高濃度的血紅蛋白、甘油三脂；乙醇；胍鹽；SDS等強PCR抑制劑。在血液直擴PCR實驗中，RAPA3G PCR Mix性能與KAPA3G DNA聚合酶展現出同等的表現，其性能表現優于二代聚合酶（血液擴增Hemo KlenTaq Mix）。在植物直擴PCR實驗中，RAPA3G PCR Mix在配合DNA釋放劑的條件下與KAPA3G Plant PCR試劑盒性能一致。 長片段擴增能力方面，使用該酶可輕松擴增8kb的基因組片段，20kb的λ DNA，8kb的cDNA。該酶具有6kb/min以上的擴增速度，可顯著的縮短PCR的擴增時間，在常規測試條件下，10s的延伸時間可完成1kb的基因組DNA擴增。在PCR擴增成功率方面，與其它類型的PCR擴增試劑對比中，RAPA3G PCR Mix表現出的PCR擴增成功率。此外，該酶包含一定比例的RAPA HiFi超保真DNA聚合酶，因此其具有一定的保真性能（經藍白斑測試，其保真性能約為Taq DNA聚合酶的56倍）。另外，RAPA3G系列產品均采用專有的熱啟動技術，確保50°C以下無活性，僅有95°C加熱5min以后才能恢復其活性，因此可最大限度的提高擴增的特異性，減少非特異性產物的產生。該PCR Mix具有5'-3'的聚合酶活性、5'-3'的外切酶活性和3'-5'的外切酶活性，產物部分帶有"A"尾巴，部分為平末端，因此產物均可用于TA克隆或平端克隆。 | ||||||||||||||||||||||||||
特征和用途 | ||||||||||||||||||||||||||
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RAPA3G DNA聚合酶對抑制物耐受性 | ||||||||||||||||||||||||||
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50μl體積建議添加的樣品量 | ||||||||||||||||||||||||||
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儲存 | ||||||||||||||||||||||||||
| 長期儲存置于-20°C以下，可保存2年，避免反復凍融；短期使用置于4°C（3個月）保存，一經融化后請放置于4°C，勿再凍存。 | ||||||||||||||||||||||||||
反應實例 | ||||||||||||||||||||||||||
| 1. 模板適應性強，長片段和短片段都可有效擴增 | ||||||||||||||||||||||||||
| Lane 1：λDNA 500bp, 2：λDNA 1kb, 3：λDNA 2kb, 4：λDNA 5kb, 5：λDNA 8kb, 6：λDNA 15kb, 7：λDNA 20kb, 8：human 500bp ,9：human 1kb, 10：human 2kb ,11：human 5kb, 12：human 8kb, 13：cDNA 166bp, 14：cDNA 552bp, 15：cDNA 960bp, 16：cDNA 1574bp, 17：cDNA 1705bp, 18：cDNA 2755b,p 19：cDNA 4128bp, 20：cDNA 7600bp, M：DNA Marker 10000 | ||||||||||||||||||||||||||
| 選取三種DNA模板，使用RAPA3G PCR Mix進行擴增，循環數統一為28 cycles，結果如上圖所示，對于不同種類DNA模板和不同長度的靶基因，RAPA3G PCR Mix均有良好的擴增性能。 | ||||||||||||||||||||||||||
| 2. 對于粗制樣品DNA具有的耐受性 | ||||||||||||||||||||||||||
| 分別以人全血、血清、葉片粗制品DNA以及大豆種子粗制品DNA為模板，使用RAPA3G PCR Mix進行PCR擴增，結果如上圖展示，各種粗制樣品都有良好的擴增，其中全血和血清可耐受15%。 | ||||||||||||||||||||||||||
| 3.擴增靈敏度高，λDNA模板低至0.1pg也可以有效擴增 | ||||||||||||||||||||||||||
| 以λDNA為模板，選取不同模板使用量，采用RAPA3G PCR Mix進行擴增2kb靶基因，循環數統一為28 cycles，結果如上圖所示，λDNA模板低至0.1pg也可以有效擴增 | ||||||||||||||||||||||||||
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