豇豆慢生根瘤菌圖片低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本信息:
資源名稱 豇豆慢生根瘤菌圖片
種屬:Bradyrhizobiumvigna
安全等級 1
模式菌株 no
應用領域 與柱花草共生固氮
培養方法
培養基 9
生長條件 28-30
脫水存法:
①豇豆慢生根瘤菌圖片沙土保存法,能產孢子的細菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內,裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經真空抽干,外觀呈松散狀態,于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。
③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
微生物菌種的培養:
⒈豇豆慢生根瘤菌圖片孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
注意事項:
1、豇豆慢生根瘤菌圖片忌與殺菌的化學農藥一并使用,使用過的殺菌劑或者噴霧器需要*清洗后才能使用。
2、包裝開啟后請一次性用完,未用完應密封,并放置于陰涼、干燥的環境里保存。
3、貯存方法:在密封、陰涼、干燥之處保存
藍PA3192 ug
apo- 轉鐵蛋白pAAV-helper2 ug
L- 轉鐵蛋白pAAV-hrGFP2 ug
反玉米素pAAV-hrRC2 ug
D- 海藻糖pAAV-IRES-hrGFP2 ug
三酸pAAV-LacZ2 ug
N- 三 ( 羥基 ) 基甘氨酸pAAV-MCS2 ug
2,3,5 化三基四唑pAAV-RC2 ug
三 ( 羥基 ) 氨基烷pAc5.1/V5-His A2 ug
三 ( 羥基 ) 氨基烷鹽酸鹽pAc5.1/V5-His B2 ug
曲拉通 X-100pAc5.1/V5-His C2 ug
曲拉通 X-114pAc5.1/V5-His/LacZ2 ug
臺盼藍pAc5.1B-EGFP2 ug
胰蛋白酶 1:250pAcAd5 9.2-100 2 ug
胰蛋白酶抑制劑pAcAd5 CMV-GFP 2 ug
進口、國產緩沖MUG瓊脂用于濾膜MUG法檢測食品中大腸桿菌數(SN/T1059.2)Buffered MUG Agar100
進口、國產乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(SN/T1059.2)LMG Agar250
進口、國產茜素-β-半乳糖苷瓊脂用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(GB/T)Aliz-gal Agar250
進口、國產Tergitol-7 瓊脂用于大腸菌群的鑒定(NMKL)Tergitol-7 Agar250
進口、國產TTC 溶液(0.125%)添加于HB0127中TTC Solution(0.125%)2ml*10
進口、國產標準I號營養瓊脂標準細菌計數、含糖(MERCK方法)Standard I Nutrient Agar250
豇豆慢生根瘤菌圖片MH肉湯(MHB) 250(g)
Antibiotic agar 1 GROVE and RANDALL medium 1 抗生素瓊脂11號 1.05269.0500MERCK默克
Reinforced clostridial medium(RCM)梭狀芽孢桿菌加強培養基 1.05411.0500MERCK默克
KLIGLER agar Double sugar iron agar acc.toKLIGLER KLIGLER 1.03913.0500MERCK默克
Nutrient agar營養瓊脂 1.05450.0500MERCK默克
Standard count agar標準計數瓊脂 1.01621.0500MERCK默克
PALCAM培養基基礎 與PALCAM抗生素添加劑聯用,分離培養食品中的李斯特菌500g