產(chǎn)品名稱：81孔液氮罐凍存盒說明書
規(guī)格：>100次
儲存條件:—20℃,12個(gè)月
用途:又稱培養(yǎng)細(xì)胞消化液,用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項(xiàng):無菌溶液，經(jīng)過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料：
1、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
操作步驟(僅供參考)：
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng)：
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中，要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說明：
1. 貼壁細(xì)胞的消化：
a.吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅，不含EDTA)，略蓋過細(xì)胞，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
c.顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅，不含EDTA)。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅，不含EDTA)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅，不含EDTA)后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 組織的消化：
a.不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄：不同胰酶細(xì)胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強(qiáng)，推薦選擇C0201胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅)，這兩種胰酶細(xì)胞消化液都含有EDTA，消化能力相對更強(qiáng)一些。
2. 如果希望觀察比較方便，推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅，不含EDTA)。
3. 對于酚紅可能會干擾后續(xù)的測試分析，推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶，不含EDTA)。
4. 對于EDTA可能會干擾后續(xù)的測試分析時(shí)，推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶，不含EDTA)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅，不含EDTA)。
5. 對于胰酶特別敏感的細(xì)胞，即對于消化時(shí)間特別快、消化時(shí)間比較難控制的情況，推薦選擇C0202胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
Cfr13I (Sau96I) 1000 units
Cfr42I (SacII) 1200 units
Cfr42I (SacII) 5x1200 units
Cfr42I (SacII) 2000 units
Csp6I (CviQI) 1500 units
DraI 1500 units
DraI, HC 7500 units
Eam1104I (EarI) 300 units
Eam1104I (EarI) 1500 units
Eam1105I (AhdI) 1000 units
Ecl136II (EcoICRI) 1500 units
EcoO109I (DraII) 2000 units
EcoRI 5000 units
EcoRI 5x5000 units
EcoRI, HC 25000 units
EcoRI 10000 units
Eco24I (BanII) 1500 units
Eco31I (BsaI) 1000 units
Eco31I (BsaI) 5000 units
Eco32I (EcoRV) 2000 units
Eco32I (EcoRV) 5x2000 units
Eco32I (EcoRV), HC 10000 units
Eco32I (EcoRV) 4000 units
Eco47I (AvaII) 800 units
Eco47I (AvaII) 4000 units
Eco47III (AfeI) 200 units
