胚胎細胞融合儀器CF-150B核移植是將細胞核從供體轉入受體的過程。細胞核指導胚胎的發育,導致新生體安全出生。在這個過程中,電融合用于將供體細胞與受體卵細胞融合,并進一步激活細胞分裂,形成胚胎。Meng等人(1997)將核移植技術擴展至靈長類動物模型,克隆出恒猴。技術的進步使研究人員能夠從分裂球進展至更高分化的胚胎細胞以及靜止的胚兒細胞,作為核的供應來源。胚胎產生的細胞在體外培養6-13代,然后在轉入前使用血清饑餓的方法使細胞靜止。
胚胎細胞融合儀器CF-150B如前文所述,Roble、Cibelli以及Stice是**次在1998年報告使用非老化胚成纖維細胞作為核的供體進行核移植而產生綿羊克隆轉基因牛的人。IanWilmut在1996年震驚了整個世界,他從成年的細胞產生出**個動物克隆——多利。使用分化的成年細胞進行克隆的能力打開了核移植廣泛運用的大門即基因**的令人激動的模式。*近的成功事例PPLTherapeutics公司從成年體細胞克隆出豬。對于這些用途可以使用多種細胞融合樣品池及微型載玻片。
細胞融合儀
CF-150B胚胎細胞融合儀器和相關電極槽(GSS-250)專為哺乳動物胚胎分裂球電融合而設計,可在電解液或非電解液中運用。一個適當導向的短電脈沖施加在早期胚胎可以溶解細胞膜,從而完成細胞質和細胞核融合。此儀器的主要應用是產生小鼠四倍體胚胎產生和體細胞核轉移克隆。標準的雙細胞分裂期胚胎能夠迅速地融入單個細胞(單細胞分裂期四倍體胚胎)。這種四倍體胚胎可用于與遺傳控制小鼠胚胎干細胞(ES)聚合,從而產生*的ES衍生細胞胎兒(Nagyetal.,1990;NagyandRossant;1993)。
隨著ES細胞遺傳控制技術的發展,ES衍生細胞胚胎有了更廣闊的應用空間:
1、應用于測試新衍生的或遺傳控制的胚胎干細胞的發育潛能(Nagy et al., 1993).
2、*ES衍生細胞胎兒為不同功能或遺傳研究提供豐富的組織和器官前身資源(Forrester et al. 1991).
3、*近,gene-trap戰略用于*衍生ES胚胎聚合,此胚胎由ES四倍體細胞胚胎產生,從而獲取基因表達模式的直接信息CF-150B細胞融合儀和專業設計的高精度電極槽一起使用。槽有三種不同的縫間隙,250µm,500µm和1000µm,型號名分別為GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做雙細胞期分裂球融合時,任何一種槽均可使用。如果用于克隆目的,我們*GSS-250。電極材料是高品質不銹鋼的,并將其安置在一種厚玻璃中。所有這些材料具有生物安全性,無毒。