描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名 | 22RV1前列腺癌細胞價格 |
規格 | T25m2 |
貨號 | CS-963210 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結合蛋白 96T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子
Anti-Dnmt3β DNA甲基轉移酶-3β抗體 0.1ml
Anti-DPPA2 多能發育相關基因2抗體 0.2ml
Anti-DR3/TNF-αR/TRAMP TNF-α膜受體抗體/DR3 死亡受體3抗體 0.1ml
Anti-DR4/APO2/TRAILR1 死亡受體4抗體 0.1ml
Anti-DTNBP1 精神分裂癥易感基因抗體 1ml
Anti-DVL1 蓬亂蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Dynamin 2 兔抗人鳥苷三磷酸酶-發動蛋白2抗體 0.1ml
Anti-E2F1 轉錄因子E2F-1抗體 0.1ml
Anti-E2F2 轉錄因子E2F-2抗體 0.1ml
Anti-E7 protein 人乳頭瘤病毒16型E7抗體 0.1ml
Anti-EAAT1/Glast 膠質細胞谷氨酸運載蛋白1 抗體 0.1ml
Anti-EBNA-3 EB病毒編碼核蛋白-3抗體 0.1ml
Anti-ECE1 內皮素轉化酶1ECE1抗體 0.1ml
Anti-ECG2 食道癌相關基因抗體 0.1ml
Anti-ECM1 細胞外基質蛋白1抗體 0.2ml
Anti-ED-1 外胚層發育不良抗體 0.1ml
Anti-EGF-R 表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Anti-EGFR-ⅤⅢ 表皮生長因子受體-8抗體 0.2ml
Anti-Egr-1 早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗體 0.1ml
Anti-Emp1 表皮膜蛋白1抗體 0.2ml
anti-EMAb 抗子宮內膜抗體 0.2ml
Anti-Endostatin 內皮抑素/內皮他丁抗體 0.1ml
Anti-EpCAM 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗體 0.2ml
Anti-EPEC-IgG O 大腸埃希桿菌O抗體 0.2ml
Anti-EphA2 R 酪氨酸蛋白激酶受體A2抗體 0.1ml
Anti-EphB2 R 酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體 0.1ml
Anti-ER 雌激素受體 0.1ml
Anti-ERAB 內質網Aβ相關結合蛋白抗體 0.2ml
1 96T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯素 96T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺 96T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 96T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性磷酸酶B 96T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白 96T
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥基維生素D3 96T
Human histon-H2b ELISA Kit 人組蛋白H2b 96T
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保護素 96T
BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體Ⅱ 96T
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1A 96T
BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki 人骨成型蛋白4 96T
BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 人骨成型蛋白2 96T
cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit 人環磷酸腺苷 96T
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit 人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶 96T
CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶7 96T
CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶2 96T
CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶1 96T
AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人乳酸脫氫酶 96T
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2 96T
UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1 96T
22RV1前列腺癌細胞價格ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脫氫酶 96T
RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit 人Rho家族GTP酶1 96T
RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit 人受體TNFRSF結合絲氨酸蘇氨酸激酶2 96T
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。