而隨著生產(chǎn)工藝及分析手段的進(jìn)步,單克隆抗體類藥物的質(zhì)量控制將更加嚴(yán)格。高效液相色譜(HPLC)作為一種分離技術(shù),在蛋白質(zhì)、抗體等生物大分子的分離分析方面已得到越來越廣泛的應(yīng)用。但是,目前市面上的方法分析單克隆抗體存在著響應(yīng)不高,峰型不好或者理論塔板數(shù)不佳的情況。而GL Sciences新上市的MonoSelect RP-mAb單克隆抗體專用柱可以有效解決此類問題。
- 基本參數(shù):
貫通孔尺寸:1 μm
中孔尺寸:60 nm
表面積:50 m2/g
化學(xué)鍵基團(tuán):苯基
含碳量:2 %
內(nèi)徑:2.1 mm
長度:20 mm
色譜柱類型:柱套式
推薦工作溫度:80 ℃
推薦工作壓力:40 MPa
推薦工作pH范圍:2~7.5
- 何謂整體化硅膠柱


- 特點(diǎn)
通過利用硅膠整體柱的低壓特性,MonoSelect RP-mAb可以在高流速下快速分析。

- 實(shí)現(xiàn)低濃度下高靈敏度分析
MonoSelect RP-mAb硅膠整體孔的介孔設(shè)計(jì)為60 nm,適合mAb分析,表面經(jīng)過惰性化處理,低濃度分析下也能得到尖銳的峰形 。

- 提升高溫測定時(shí)色譜柱的耐久性

Column: MonoSelect-RP mAb
Eluent: A:H2O (0.1 %TFA) B:MeCN(0.1 %TFA)
Gradient: A/B = 90/10-(10 min)-10/90-(0.1 min)-90/10-(20 min)-90/10
Flow Rate: 0.3 mL/min
Oven Temp.: 80 ℃
Injection Vol.:5 μL
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1. 還原處理前后的輔助因子分析
MonoSelect RP-mAb不僅可以用于分析還原前的抗體,還可以用于分析輔助因子。

2. 木瓜蛋白酶處理的抗體消化物分析
木瓜蛋白酶是在活性位點(diǎn)具有巰基的非特異性硫醇內(nèi)肽酶。在還原劑的存在下,IgG分子在一個(gè)或多個(gè)鉸鏈區(qū)中切割肽鍵,從而產(chǎn)生兩個(gè)Fab片段和一個(gè)Fc片段。
通過使用Monoselect RP-mAb,您可以監(jiān)控木瓜蛋白酶對(duì)mAb的消化狀態(tài)。

3. ADC(抗體藥物偶聯(lián)物)分析案例研究
分析條件
Eluate:
A) 0.075 % FA + 0.025 % TFA in H2O
B) 0.075 % FA+0.025 % TFA in ACN A/B = 80/20-(5min)-40/60
Flow rate: 0.3 mL/min
Oven Temp.: 80 ℃
Detection: 214 nm
Injection Vol.: 1 mL
Sample: SigmaMAb Antibody Drug Conjugate (ADC) Mimic (1 mg/mL) (Antibody Cysteine-Fluorophore Conjugate Standard)

通過使用MonoSelect RP-mAb,可以知道ADC的藥物-抗體比率(知道在哪個(gè)二硫鍵位置通過連接器將藥物導(dǎo)入的分布量)。
