當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIL-27人白介素27ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | IL-27人白介素27ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | human Interleukin 27, IL-27 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63245 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Neisseria meningitidis 腦膜炎奈瑟菌Neisseria meningitidis分離基物:腦膜炎患者的脊髓液凍干管,斜面培養物安全等級:2Media sting蛋白胨10g,葡萄糖2g ,NaCl 5g, NaH2PO4 2.5g, 檸檬鈉)5g, 腦浸汁)800ml, 豬心浸液 200ml, 羊血10%, pH 7.2 [注]豬心和豬腦浸汁法:(1)新鮮豬心除去心頭和脂肪,攪碎100克加蒸餾至1000毫升;(2)新鮮豬腦除去血管,取200克加蒸餾至1000毫升;(3)50℃保溫1時,然后煮開15分鐘;(4)冷卻后用紗布過濾備用。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養基:充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。生長條件:37℃,5%CO2存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:>98.0%(T),升華提純
Streptomycesalbussubsp.albu 白色鏈霉菌白色亞種Streptomycesalbussubsp.albu安全等級:1模式菌株:no158生長條件:28℃ 純度:>98.0%(T),升華提純
Lentzeasp LentzeaspLentzeasp分離基物:泥安全等級:1模式菌株:no產抗生素。155生長條件:28℃ 純度:98%
Streptomycesclavuligerus 帶棒鏈霉菌Streptomycesclavuligerus分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:;基因組序列號:ABJH00000000,CM000913,CM001015;提取物能夠通過環化作用將乙酰-L-半胱氨酰-D-纈氨轉變為芐青霉素158生長條件:28℃ 純度:97%
Streptomycesscabiei StreptomycesscabieiStreptomycesscabiei分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:70生長條件:28℃ 純度:97%
Salmonella enrica subsp. enrica serovar Typhimurium 腸沙門氏菌腸亞種鼠傷寒血清型Salmonella enrica subsp. enrica serovar Typhimurium凍干物安全等級:2模式菌株:no研究、質量控制。研究、質量控制,《GB 4789.28 培養基:和試劑的質量要求》標準菌株。營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。生長條件:37℃,好氧生長特性G-桿菌,精氨雙解酶陰性,賴氨脫羧酶、鳥氨脫羧酶陽性,氧化酶、尿素酶陰性,吲哚陰性,檸檬鹽實驗陰性,不發酵蔗糖、肌醇,有動力、產生H2S,兼性厭氧,適pH7.4~7.6。血清型:O 4,5,12 : H i : 1,2 。存儲條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度:97%
Brevibacrium│flavum 黃短桿菌Brevibacrium│flavum斜面培養物安全等級:1模式菌株:no產蘇氨。CM0002生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
Enrobacr│gergoviae 日溝維腸桿菌Enrobacr│gergoviae凍干物安全等級:1模式菌株:no研究CM0002生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98 atom % D
IL-27人白介素27ELISA試劑盒實驗原理RS瓊脂腦膜培養基卵巢癌組織源性原代GSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β(抗原)
AHM鑒別用培養基神經培養基癌組織源性原代CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 ) G蛋白偶聯受體-2(抗原)
脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂培養基少突膠質前體培養基組織源性原代GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 葡萄糖合成激酶-3(抗原)
蔗糖胰蛋白胨肉湯球狀少突培養基皮膚癌組織源性原代GTP-CH-1 三磷鳥苷環水解酶(抗原)
胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯(TSB-YE)少突膠質培養基膠質瘤組織源性原代H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病M2型(抗原)
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)少突膠質前體分化培養基髓母瘤組織源性原代HCV-Core 丙型肝炎病-C區(多肽)
李氏菌選擇性培養基基礎(MMA)雪旺培養基胃癌組織源性原代成纖維HCV-NS1 丙型肝炎病-NS1(抗原)
糖發酵肉湯基礎星形膠質培養基肺微血管內皮HCV-NS3 丙型肝炎病-NS3(抗原)
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。