產品說明
SCIENTZ-2C基因導入儀由儀器主機、基因導入杯及連接線等組成。主要是利用電轉化來將DNA轉入受態細菌、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比，基因導入儀法具有高重復性，高效率、操作簡易、可定量控制等優點，同時，電轉沒有基因毒性，已經成為的分子生物學基本技術。
工作原理
細胞電轉染（電轉），也叫細胞電穿孔 (electroporation)，是把外源大分子物質DNA、RNA、siRNA、蛋白質等以及一些小分子導入細胞膜內部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下，溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大，細胞外部電流場產生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受，細胞質內分到的電壓可以忽略不計，細胞質內部幾乎沒有電流，因此也決定了正常范圍內的電轉過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近，隨后細胞本身的機制可以允許這些物質到細胞核等處。
由于電轉技術依靠的是物理方法，細胞表面的分子特性對電轉影響比較小。相比化學轉染方法和病毒載體轉染方法，電轉可以用在所有的細胞種類上，而且容易定量控制。
細胞電轉電場圖 1 細胞膜近似絕緣體，細胞附近電轉液中電流扭曲。 2 在串聯電路中電阻越大分到電壓越大，細胞兩端電壓基本都落在兩端細胞膜上。 3 只有一個細胞端面電轉有效。 4 細胞質內分到電壓很小，DNA電轉進入細胞膜后馬上停止，后續靠細胞本身機制慢速擴散。 5 細胞核兩端電壓及其微小，微小的電壓又落在核膜上，核內部沒有電壓，電轉沒有基因毒性。 |
|
應用領域
|
|
|
|
? 細菌、酵母及其他微生物的電轉化 | ? 導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結構和功能進行研究 | ? 細胞雜交、融合基因導入 |
? 導入標記基因起到標記、指示的作用 | ? 哺乳動物細胞的轉染、植物組織和原生質體質體的轉染 |
產品特點
? 轉化率高 轉化時間短、重復性優異 | ? 智能儲存 可存儲實驗日志，并且自定義程序無存儲 |
? 控制精準 采用微處理器控制的脈沖放電 | ? 外形美觀 整機一體化設計，顯示直觀，操作簡單 |
實驗介紹
1、LI J等人基于高通量篩選分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制劑的研究結果。 | 2、ZHANG S Y等人發現和鑒定一個的G蛋白偶聯受體119激動劑的研究結果 | |
|
|
1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌種的轉化率
| 品種 | 品種 | 電容 | 電阻 | 導入盒 | 轉化率 | 反饋用戶名 |
| 酵母 | 1200-1500V | 25µF | 200-400Ω | 2mm | 2.2-3.2*102cfu/ug DNA | 上海肺科醫院 |
| 大腸桿菌 | 1250V | 5µF | 400-1000Ω | 1mm | 10 -10 cfu/ug DNA | 清華大學 |
| 大腸桿菌 | 1100V | 5µF | 500Ω | 1mm | 2500cfu/ug DNA | 清華大學 |
| 大腸桿菌 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 2500cfu/ug DNA左右 | 總醫院 |
| 羊細胞 | 250V | 500µF | 500Ω | 4mm | 102cfu/ug DNA | 中科院發育所 |
| 畢赤酵母 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 1.8x103cfu/ug DNA | 華東師范大學 |
| 枯草芽孢桿菌 | 1250V | 25µF | 400Ω | 2mm | 102cfu/ug DNA | 華東師范大學 |
備注：因各單位實驗條件不盡相同，以上實驗參數僅供參考
