HP-Diol色譜柱使用說(shuō)明
色譜柱信息
HP-Diol鍵合固定相采用*的創(chuàng)新設(shè)計(jì)，以高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì)，通過(guò)采用高純度鍵合試劑，很大限度實(shí)現(xiàn)單層官能團(tuán)覆蓋和******的殘余硅醇基封尾，含碳量可高達(dá)8.8%。該填料為均一的球形顆粒，孔徑為80 ?和120 ?，比表面積300m2/g。1,2-二羥基丙醚鍵合相的極性特征對(duì)于極性化合物有著較強(qiáng)的保留。通過(guò)運(yùn)用的勻漿裝填技術(shù)裝填得到的HP-Diol柱柱床密度均一穩(wěn)定，因此可******具有很好的柱效。HP-Diol柱一般用于多肽、蛋白和極性藥物分子等分離。此外，HP-Diol柱還可以體積排阻機(jī)理用于生物分離過(guò)程中。
穩(wěn)定性和性能
HP-Diol柱使用的是被******覆蓋的鍵合硅膠填料，因此具有******的化學(xué)穩(wěn)定性，特別適用于許多分析物的確認(rèn)。通過(guò)嚴(yán)格控制單分子層形成以及封尾的化學(xué)反應(yīng)條件，可確保柱與柱之間有著******的重現(xiàn)性。
右圖是對(duì)4.6 x 250 mm HP-Diol柱進(jìn)行測(cè)試得到的色譜圖。
Column: HP-Diol (5μm, 120 ?, 4.6×
phase: Hexane:Ethanol = 80:20（v/v ）
Flow rate: 1.0 mL/min
Column temperature: Ambient (
Detecter (UV): 254 nm
Injection volume: 1.0 μL
Sample: 1. Anisole
2. Phenol
3. 4-Nitrophenol
安全注意事項(xiàng)
HP-Diol柱通常在高壓下運(yùn)行。如果管路連接不緊，將會(huì)導(dǎo)致有機(jī)溶劑和注入樣品的泄漏，從而對(duì)操作人員的健康產(chǎn)生影響。一旦發(fā)生泄漏，應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)氖痔走M(jìn)行處理。另外當(dāng)打開(kāi)色譜柱時(shí)還應(yīng)采取適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)措施，以防止微小的硅膠顆粒進(jìn)入呼吸道。
樣品與流動(dòng)相
新的HP-Diol柱中的液相是QC流動(dòng)相。在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，硅膠填料可能會(huì)干涸。這時(shí)推薦用10-20倍柱體積的純乙醇沖洗以活化色譜柱。接著可用用戶自己選擇的流動(dòng)相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩(wěn)定為止。如果柱壓和基線波動(dòng)較大，這可能是氣泡進(jìn)入了色譜柱中。這時(shí)可用較高流速?zèng)_洗色譜柱2-5分鐘，例如4.6x150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。
為了避免色譜柱的堵塞，所有樣品和溶劑，包括緩沖溶液在內(nèi)，都必須在使用前用0.45mm或0.2mm的濾膜過(guò)濾。HP-Diol鍵合固定相與許多溶劑相容，包括非極性溶劑、極性有機(jī)溶劑、水、緩沖液或有機(jī)試劑與水的混合物（如甲醇或乙腈的水溶液等）。流動(dòng)相在使用前需要脫氣。一個(gè)簡(jiǎn)單的脫氣方法是將流動(dòng)相在由水泵形成的真空下超聲5min。色譜柱的保養(yǎng)
pH 避免在pH低于2或高于9的條件下使用HP-Cyano柱。較高的pH會(huì)溶解硅膠，從而使部分或全部的氰丙基鏈從硅膠表面脫落，引起分離效率的降低和保留時(shí)間的改變。為了獲得很好的分離效果和延長(zhǎng)柱的使用壽命，請(qǐng)盡量使用pH在2-8范圍內(nèi)的流動(dòng)相。
壓力 盡管HP-Diol柱可在高至5000psi的壓力下使用，但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?000psi。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)損壞色譜柱和。由于壓力來(lái)源于流速，因此流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言，柱壓會(huì)隨著色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下，建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。
溫度 操作溫度為60 oC。長(zhǎng)時(shí)間在高溫（>75oC）下操作也會(huì)損壞色譜柱，這種情形在高的pH（>8.5）條件下特別突出。
儲(chǔ)藏 長(zhǎng)期不用時(shí)，請(qǐng)不要讓水或緩沖液存留在色譜柱中。在替代緩沖液時(shí)，請(qǐng)用至少20-30倍柱體積的50%甲醇（或乙腈）水溶液沖洗色譜柱，再用20-30倍柱體積的純有機(jī)溶劑如乙腈等進(jìn)行沖洗。每根色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中均會(huì)附有兩個(gè)可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸，請(qǐng)用堵頭塞緊色譜柱的兩端。
Sepax HP-Diol產(chǎn)品規(guī)格
ID x Length | Particle size | Pore size | P/N |
2.1x150mm | 3 mm | 120 ? | 116423-2115 |
2.1x100mm | 3 mm | 120 ? | 116423-2110 |
2.1x50mm | 3 mm | 120 ? | 116423-2105 |
2.1x30mm | 3 mm | 120 ? | 116423-2103 |
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4.6x250mm | 3 mm | 120 ? | 116423-4625 |
4.6x150mm | 3 mm | 120 ? | 116423-4615 |
4.6x100mm | 3 mm | 120 ? | 116423-4610 |
4.6x50mm | 3 mm | 120 ? | 116423-4605 |
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2.1x250mm | 5 mm | 120 ? | 116425-2125 |
2.1x150mm | 5 mm | 120 ? | 116425-2115 |
2.1x100mm | 5 mm | 120 ? | 116425-2110 |
2.1x50mm | 5 mm | 120 ? | 116425-2105 |
2.1x30mm | 5 mm | 120 ? | 116425-2103 |
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4.6x250mm | 5 mm | 120 ? | 116425-4625 |
4.6x150mm | 5 mm | 120 ? | 116425-4615 |
4.6x100mm | 5 mm | 120 ? | 116425-4610 |
4.6x50mm | 5 mm | 120 ? | 116425-4605 |
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7.8x250mm | 5 mm | 120 ? | 116425-7825 |
10.0x250mm | 5 mm | 120 ? | 116425-10025 |
21.2x250mm | 5 mm | 120 ? | 116425-21225 |
21.2x150mm | 5 mm | 120 ? | 116425-21215 |
21.2x50mm | 5 mm | 120 ? | 116425-21205 |
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