原代雞卵泡顆粒細(xì)胞
| 英文名稱(chēng) | Chicken Follicle Granulosa Cells | 組織來(lái)源 | 雞卵泡組織 |
| 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 貨號(hào) | GOY-01X0672 |
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
傳代特性可傳1代
消化液0.25%
| 雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自雞卵泡組織；成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔，內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮，胞核圓形，細(xì)胞間可見(jiàn)許多毛細(xì)血管，外膜細(xì)胞位于最外層，多呈梭形，與周?chē)Y(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞，在卵泡開(kāi)始發(fā)育、卵細(xì)胞成長(zhǎng)的同時(shí)，周?chē)牧庑渭?xì)胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮?fù)層，因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱(chēng)為顆粒細(xì)胞。初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞為單層；次級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層；成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開(kāi)又變?yōu)閱螌印ｎw粒細(xì)胞的胞核大而圓，著色深，細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長(zhǎng)突起伸入放射帶的凹陷部。 |
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞卵泡顆粒細(xì)胞采用先機(jī)械分離后膠原酶 聯(lián)合消化法、并通過(guò)專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的雞卵泡顆粒細(xì)胞經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀 變成 絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
| 人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 夏威夷鏈霉菌 |
| 小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞 | 炭疽芽胞桿菌 |
| 豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 | 擬諾卡氏菌 |
| 大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞 | 尖孢鐮孢 |
| 兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 | 短芽孢桿菌 |
| 雞肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 梨形卷枝霉 |
| 人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 埃希氏菌 |
| 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 | 豌豆根瘤菌 |
| 豬脂肪細(xì)胞 | 藍(lán)色犁頭霉 |
| 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 | 雅致小克銀漢霉 |
| 兔視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | 曲霉 |
| 雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 鮑氏志賀菌 |
| 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 長(zhǎng)柄鏈格孢 |
| 小鼠氣管上皮細(xì)胞 | 中甸隔指孢 |
| 豬前脂肪細(xì)胞 | 粗壯假絲酵母 |
| 大鼠氣管上皮細(xì)胞 | 沙門(mén)氏菌 |
| 兔晶狀體上皮細(xì)胞 | 膠孢刺盤(pán)孢 |
| 雞胚成纖維細(xì)胞 | 長(zhǎng)棒孢 |
| 人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞 | 小腸結(jié)腸炎耶爾森菌 |
| 小鼠氣管平滑肌細(xì)胞 | 亞鐵氧化酸硫桿狀菌 |
| 豬心臟瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞 | 疣孢青霉 |
| 大鼠氣管平滑肌細(xì)胞 | 香菇 |
| 兔肌腱干細(xì)胞 | 原代雞卵泡顆粒細(xì)胞大奇異球菌 |
| 雞前脂肪細(xì)胞 | 發(fā)酵放線纖絲菌 |
| 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 | 刺黑烏霉菌 |
| 小鼠肺成纖維細(xì)胞 | 小舟單頂孢 |
| 豬成骨細(xì)胞 | 黃綠蜜環(huán)菌 |
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時(shí)培養(yǎng)，可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時(shí)間不能超過(guò)24h。
2. 從消化道、周?chē)袎乃澜M織等污染因素存在的區(qū)域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁，可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1～2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染，一旦發(fā)現(xiàn)，要及時(shí)清除。
