原代人神經少突膠質細胞
培養基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
人神經少突膠質分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統，在銀浸染標本中，少突膠質細胞比星狀膠質細胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞，其突起并不少，而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變，還會引起神經元損傷或精神類疾病，甚至可以引發腦腫瘤。根據少突膠質細胞的分布和位置可分為三種：①束間少突膠質細胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中樞神經系統的白質的神經纖維束之間；②神經細胞周少突膠質細胞（perineuronal-oligodendrocyte），分布在中樞神經系統的灰質區，常位于神經細胞周圍，與神經細胞的關系密切，故又稱為神經細胞周衛星細胞（perineuronal-satellite-cell），但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔；③血管周少突膠質細胞（pcrivascular-oligodendrocyte），主要分布在中樞神經系統內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是最為特化和復雜動物細胞膜之一，其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩定結構。如半乳糖腦苷脂（GC），它是髓鞘的一種主要類脂，用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來，神經發育學科進展較快，更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來，如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。 |
方法簡介：
公司實驗室分離的人神經少突膠質采用yi蛋白酶消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人神經少突膠質經GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
英文名稱 | Human Oligodendrocyte Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1068 |
1. 取材的組織要盡快培養。如若不能及時培養，可將組織浸泡于培養液內，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養。
3. 組織塊不易貼壁，可預先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養的1～2d內要特別注意觀察是否有細菌、真菌、霉菌的污染，一旦發現，要及時清除。
1. 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶（或皿）中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和 非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀 變成 絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
4. 器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
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