產(chǎn)品名稱 | 原代兔骨髓單核細(xì)胞 | 英文名稱 | Rabbit Bone Marrow Monocyte Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X0748 |
組織來源 | 骨髓 | 細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
兔骨髓單核分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細(xì)胞是一種未成熟的單核細(xì)胞,在骨髓細(xì)胞中約占0.04%,被認(rèn)為是破骨細(xì)胞的前體細(xì)胞,較外周血單個核細(xì)胞誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細(xì)胞數(shù)量多,純度高,較脾細(xì)胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細(xì)胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細(xì)胞,它屬干細(xì)胞類型。目前,大多數(shù)研究用淋巴分離液分離提取骨髓單核細(xì)胞,最近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細(xì)胞。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔骨髓單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞C8166(STR鑒定正確) | 人肝癌細(xì)胞 Huh7.5.1(STR鑒定正確) |
人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞帶熒光Bcpap+LUC(STR鑒定正確) | 肝胰腺細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠黑色瘤細(xì)胞B16-F10(種屬鑒定) | 肝胰腺壞死性細(xì)菌(蝦肝胰腺壞死性細(xì)菌)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞帶熒光Caki-2+LUC (STR鑒定正確) | 綿羊夏伯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人乳腺癌細(xì)胞MCF-7(STR鑒定正確) | 肝片吸蟲病通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞OP9(種屬鑒定) | 弗萊克索病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞DB(STR鑒定正確) | 跗線螨屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 | 蜂房小甲蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞KG-1(STR鑒定正確) | 高首鱘虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝株PT-67(種屬鑒定) | 馬輪狀病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞帶熒光U87 MG+LUC(STR鑒定) | 鴿皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人胎盤細(xì)胞Hs 815.Pl(STR鑒定正確) | 瓜納瑞托病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
豬腎細(xì)胞系PK13(種屬鑒定) | 原代兔骨髓單核細(xì)胞瓜納圖巴病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人漿細(xì)胞白血病ARH-77(STR鑒定正確) | 氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
犬衣原體(CP)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 鮭腎桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。