產品名稱 | 原代豬成骨細胞 | 英文名稱 | Porcine Osteoblast Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X0705 |
組織來源 | 顱骨組織 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
豬成骨分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結構，構成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域，分泌酸性物質溶解礦物質，分泌蛋白酶消化骨基質，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質，骨基質礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎，也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。
方法簡介：
公司實驗室分離的豬成骨采用先用yi蛋白酶短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的豬成骨經ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養瓶中，倒置于細胞培養箱中，
4) 2h后，培養瓶中注入2 mL內皮培養基，小心將培養瓶正置于培養箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
大鼠腎細胞NRK（種屬鑒定） | 高轉移人肝癌細胞帶熒光MHCC97-H+LUC（STR鑒定） |
人食管上皮細胞HEEC(STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒13 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人結直腸癌細胞綠色標記+熒光標記 LOVO+LUC+GFP (STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒12 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人腺癌細胞系F56 (STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒6 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人神經膠質細胞瘤細胞帶綠色熒光U251+GFP(STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒11探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人胚腎細胞 GP293(STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒（可測13種High Risk HPV） |
大鼠肝癌細胞RH-35（種屬鑒定） | 豬輪狀病毒D群探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
小鼠皮下結締組織細胞L-WRN（種屬鑒定） | 豬輪狀病毒C群探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
大鼠肺泡Ⅱ型細胞RLE-6TN（種屬鑒定） | 人乳頭瘤病毒14 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人胰腺癌細胞JF-305 (STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒16 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠結腸神經元細胞 | 人乳頭瘤病毒18 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人畸胎癌細胞NCCIT(STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒33 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
恒河猴腎細胞LLC-MK2（種屬鑒定） | 原代豬成骨細胞人乳頭瘤病毒52 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人成巨核細胞白血病細胞MEG-01(STR鑒定正確) | 人乳頭瘤病毒52b 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
對蝦白斑病毒(WSSV)檢測試劑盒（熒光PCR法） | 人乳頭瘤病毒58 探針法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜，以穩定細胞狀態，然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養液終止消化，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎培養基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮培養基繼續培養。
