產(chǎn)品名稱(chēng) | 原代小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 英文名稱(chēng) | Mouse Umbilical Artery Endothelial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X1619 |
組織來(lái)源 | 臍帶組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)信息：包被條件PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%YI蛋白酶小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自臍帶組織；它是臍動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類(lèi)的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤(pán)，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用YI蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會(huì)飄起來(lái)，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來(lái)后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí)，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
小鼠上皮細(xì)胞 | 小鼠基質(zhì)細(xì)胞 |
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞 | 對(duì)蝦桿狀病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 | 巴氏阿米巴原蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞 | 新城疫病毒PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | 豬鏈球溶血（SLY）毒基因PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠胰腺腺泡上皮細(xì)胞 | 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
小鼠甲狀旁腺細(xì)胞 | 文氏巴爾通體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
雜交瘤細(xì)胞株；6D7 | 箭毒蛙壺探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠成纖維細(xì)胞 | 中腸腺壞死桿狀病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠睪丸支持細(xì)胞 | 擬桿屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞 | 流感病毒H15亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法） |
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞 | 芽孢桿通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞 | 原代小鼠臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞地衣形芽孢桿探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 |
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞 | 柯薩奇病毒A16型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法） |
柯薩奇病毒CA16型(CAV-16)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) | 33蠟狀芽孢桿33探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過(guò)夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
