人涎腺腺樣囊性癌細胞,Acc-3細胞培養注意事項:
1.傳代培養時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染。所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每一種細胞使用一套器材。培養用液應嚴格分開。
2.每天觀察細胞形態,掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代。
3.如發現細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BSS或培養基反復清洗,隨后培養基中加入較大量的抗菌素,并經常更換培養基等。
凍存和復蘇的方法:
細胞凍存前,仔細檢查細胞凍存所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:傳代細胞單層、適宜生長液、滅活小牛血清、*溶液、7.5%NaHC03溶液、0.25%*溶液、標簽用具:100ml方瓶(培養細胞用)、克氏瓶、紅翻帽塞、吸管(10ml、lml)、細胞凍存管、二甲基亞砜、CO2孵箱、超掙臺、倒置顯微鏡、2~8℃冰箱、-20℃冰箱、液氮罐
細胞凍存開:
1.細胞:選對數生*細胞,收集細胞24小時前換液一次。
2.計數:按常規方法把細胞制成細胞懸液,計數,令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
3.凍存液:先用培養液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。
4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。
5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。
人涎腺腺樣囊性癌細胞,Acc-3細胞復蘇方法
1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。
3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養液,吹打使細胞懸浮。
4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養液漂洗、離心。
5.加入培養液適當稀釋后,再移裝入培養瓶中,置溫箱培養,次日更換一次培養液后再繼續培養。
產品名稱:
產品庫存:現貨
產品價格:詢價
質量控制:本產品經過了細菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測。
運輸保存:采用干冰保存運輸
用途: 本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存.
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