【儀表網 儀表標準】根據《中國認證認可協會團體標準管理辦法》規定，經中國認證認可協會批準立項，中國標準化研究院等單位已完成《食品中β-煙酰胺單核苷酸(NMN)含量測定 高效液相色譜法》(項目編號：2022TB028)團體標準的起草工作，形成征求意見稿，現公開征求意見。
 

　　β-煙酰胺單核苷酸(β-nicotinamide mononucleotide，NMN)是一種具有生物活性的核苷酸，由磷酸基和含核苷的核糖與煙酰胺反應自然形成。在動物細胞中 ， NMN 是 一 種 細 胞 能 量 來 源 ， 是 煙 酰 胺 腺 嘌 呤 二 核 苷 酸 (nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+)生物合成的代謝物，在細胞增殖和功能中起著至關重要的作用。研究表明補充 NMN 可以提高體內 NAD+含量，從而延緩、改善、防止衰老誘導的代謝紊亂、老年疾病等，所以 NMN 近年來成為生理醫學領域的研究熱點，并成為醫藥、功能性食品、化妝品等行業的珍貴原料。由于 NMN 在我國還未獲得藥品、保健食品、食品添加劑和新食品原料許可，所以主要作為跨境產品通過跨境電商平臺進入國內。
 

　　人體可自身合成少量 NMN，也會通過攝食西蘭花、卷心菜等果蔬補充 NMN。但由于這些果蔬中 NMN 含量都較少，如果想通過食物來補充 NMN 非常困難。所以近年來以 NMN 為主要活性物質的膳食補充劑成為消費市場的寵兒，但是諸多亂象也如影隨形，其中最嚴重的就是部分NMN 產品其中根本不含有 NMN 或者其中 NMN 含量遠少于其標稱，達到以次充好目的。目前國內可以在跨境電商平臺上購買到 NMN 跨境產品，但這類產品售價普遍十分高昂，最便宜的也要 1500 元/瓶，貴的甚至有 20000 元/瓶，如果沒有做好產品質量控制，將嚴重損害消費者權益。所以 2021 年 2 月國家市場監管總局食品經營司下發《關于排查違法經營“不老藥”的函》(以下簡稱“排查函”)，明確指出目前 NMN 在我國未獲得藥品、保健食品、食品添加劑和新食品原料許可，不能作為食品進行生產和經營，要求各個省級市場監管部門對相關經營者進行全面排查。但是目前國際上還沒有食品中 NMN 含量測定方法標準，無法對此類產品中 NMN含量進行準確測定，就無法對相關食品進行監管。
 

　　本標準針對目前國際上還沒有食品中 NMN 含量測定方法標準，無法對此類產品中 NMN 含量進行準確測定，存在質量無法控制的問題，所以需要研制食品中 NMN 含量的檢測方法標準。
 

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件規定了食品中β-煙酰胺單核苷酸(NMN)含量的高效液相色譜測定方法。本文件適用于NMN原料和含有NMN的膠囊劑、片劑產品中NMN含量的測定。
 

　　方法原理：
 

　　試樣經50%甲醇水溶液溶解，超聲提取后經離心除雜和微孔濾膜過濾，親水色譜分離，紫外檢測器檢測，外標法定量。
 

　　儀器和設備：
 

　　1.高效液相色譜儀，配有柱溫箱。2.電子天平，感量0.00001g。3.渦旋振蕩器。4.超聲波清洗器，功率不低于250W，或相當的設備。5.離心機，不低于10000rpm，或相當的設備。
 

　　取樣：
 

　　稱取NMN原料、去除膠囊外皮的膠囊劑、片劑NMN產品5g備用。
 

　　NMN原料：
 

　　取試樣混勻，精密稱取試樣0.5g(精確到0.001g)置于50mL離心管中，以50mL試樣提取溶液溶解，以10000 rpm的速度離心5min，取250μL上清液置于10 mL容量瓶中，以試樣提取溶液定容至10mL，經0.45µm有機濾膜過濾，待進樣分析，備用。
 

　　膠囊劑、片劑：
 

　　取試樣適量，混勻，研細，精密稱取試樣0.5g(精確到0.001g)置于50mL離心管中，以50mL試樣提取溶液溶解，超聲20 min使試樣充分溶解，以10000 rpm的速度離心5min，取250μL上清液置于10mL容量瓶中，以試樣提取溶液定容至10 mL，經0.45µm有機濾膜過濾，待進樣分析，備用。
 

　　高效液相色譜參考條件：
 

　　高效液相色譜參考條件如下：a) 色譜柱：Supersil HILIC 親水色譜柱，250 mm×4.6 mm，粒徑 5 μm，孔徑 100Å，或性能相當者；b) 流動相：流動相 A(4.5)：流動相 B(4.6)=15：85(V/V)等度洗脫；c) 進樣體積：10 μL；d) 柱溫：35 ℃；e) 流速：1.0 mL/min；f) 檢測波長：235 nm
 

　　試樣溶液的測定：
 

　　將試樣溶液按儀器參考條件進行測定，以保留時間定性，得到試樣溶液中NMN組分的峰面積。根據標準曲線得到待測液中NMN的濃度，平行測定次數不少于兩次。待測樣液中NMN的響應值應在標準曲線線性范圍內，超過線性范圍則應稀釋后再進行分析。NMN原料、NMN片劑產品、NMN膠囊劑產品色譜圖見附錄A。
 

　　分析過程中，每20次試樣測定后應加入1個與試樣峰面積相近的標準工作液，如果測得的值與原值相對平均偏差超過5.0%，則應重新進行標準曲線的制作。
 

　　重復性：
 

　　在重復條件下獲得的2次獨立測試結果的絕對差須不大于2個測定值的算術平均值的10%。(更多詳情請見附件)