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初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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大鼠elisa試劑盒注意方法的幾點(diǎn)

時(shí)間:2020/9/16閱讀:335
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大鼠elisa試劑盒操作方法:

1.包被抗體:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至*適濃度(1~10μg/ml),每凹孔加0.3ml,4℃過夜,或37℃水浴3小時(shí),貯存冰箱。

2.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。

3.分2組,a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原混合液0.2ml,b組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml,37℃作用1~2小時(shí)。(混合液可作成不同稀釋度)

4.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。

5.加入0.2 ml底物溶液于每個(gè)凹孔(OPD或OT),室溫作用30分鐘(另作一空白對(duì)照,0.4ml底物加0.1ml終止劑)。

6.加終止劑:每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。

7.用酶標(biāo)比色計(jì)測(cè)定a、b兩組OD值,并求出a、b、OD值的差數(shù)。

大鼠elisa試劑盒注意事項(xiàng):

1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來水沖洗。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

8.不同批號(hào)試劑組分不得混用。

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