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其它elisa試劑盒實驗原理

時間:2020/10/21閱讀:370
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其它elisa試劑盒實驗原理:

將目標抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

其它elisa試劑盒性能:

1. 靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。其它elisa試劑盒稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與其它細胞因子反應。

3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

其它elisa試劑盒安全性:

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同其它elisa試劑盒批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

10. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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