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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司資料大小
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182次VEGT-Delisa試劑盒操作要點(diǎn)有哪些
1、標(biāo)本的采取和保存
可用作 ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。
反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。
2、試劑的準(zhǔn)備
按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。 ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
3、加樣
在 ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。
VEGT-Delisa試劑盒大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)ELISA試劑盒 ,英文名: Pre-Apo-A1 ELISA Kit
大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 ,英文名: apo-A1 ELISA Kit
大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 ,英文名: PROGR ELISA Kit
大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 ,英文名: PGR ELISA Kit
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 ,英文名: PROG ELISA Kit
大鼠誘導(dǎo)型一氧化合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 ,英文名: iNOS ELISA Kit
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 ,英文名: iNOS ELISA Kit
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 ,英文名: FFA ELISA Kit
大鼠游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒 ,英文名: FEP ELISA Kit
大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 ,英文名: fPSA ELISA Kit
大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 ,英文名: FT4 ELISA Kit
大鼠游離甲狀腺激素(FT4)ELISA試劑盒 ,英文名: FT4 ELISA Kit
大鼠游離甲狀腺激素(FT3)ELISA試劑盒 ,英文名: FT3 ELISA Kit
大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒 ,英文名: F-TESTO ELISA Kit
大鼠游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒 ,英文名: FE3 ELISA Kit
大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒 ,英文名: f-βCG ELISA Kit
大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: Hp-IgG ELISA Kit
大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD-1)ELISA試劑盒 ,英文名: SCD-1 ELISA Kit
大鼠硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SCD1 ELISA Kit
大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 ,英文名: IDO ELISA Kit
大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 ,英文名: INHBP ELISA Kit
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 ,英文名: INH-B ELISA Kit
大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 ,英文名: INH-A ELISA Kit
大鼠抑胃肽(GIP)ELISA試劑盒 ,英文名: GIP ELISA Kit
大鼠抑瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒 ,英文名: OSMR ELISA KitVEGT-Delisa試劑盒
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