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豬轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒操作說明

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                   豬轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒操作說明

愿你活在當(dāng)下,保持熱忱,擁抱憧憬。雖說世間萬物,皆由命定,但也請(qǐng)為心中所愛竭盡全力,縱然到頭來只換來一場空歡的悲喜,也請(qǐng)為自己曾經(jīng)的勇氣鼓掌。接下來介紹豬轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒操作說明

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞 培養(yǎng)上清等。

(1)血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。 仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

(2)血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分 鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

(3)尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保 存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:

檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分 )。仔細(xì)收集上清。

(5)培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀 釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃 取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

(6)組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS, PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入 一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿 化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢 測,其余冷凍備用。

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