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貨號 | A01X1092 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
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細胞形態 | 淋巴母細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
產品名稱 | OKT11小鼠雜交瘤(抗CD2)細胞 | 貨號 | A01X1092 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | OKT11:OKT11 |
分類 | 小鼠細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
種屬 | 小鼠 |
年齡(性別) | 不詳 |
組織來源 | 小鼠B淋巴細胞,小鼠淋巴瘤細胞 |
細胞形態 | 懸浮細胞 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
詳情介紹 | OKT 11細胞是一株用人的T細胞白血病細胞(急性淋巴細胞白血病)對小鼠進行免疫,然后將免疫的小鼠脾細胞與P3X63Ag8.U1骨髓瘤細胞融合而建立的細胞系。免疫球蛋白;單克隆抗體;抗人T細胞(人T淋巴細胞)和人E玫瑰花環反應陽性胸腺細胞(人胸腺淋巴細胞);抗CD2。 |
生長培養基 | IMDM+20% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 3×10^5-5×10^5cells/mL |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
注意事項 | 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。 |
產品公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業或科研等非醫療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品:
鼠李糖發酵管5ml 30 支/盒 改良馬丁瓊脂培養基200ml
血鏈球菌 淺灰鏈霉菌杭州變種
蘇云金芽胞桿菌殺蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus 嗜麥芽寡養單胞菌
產紫青霉 小紅酵母
南方樹舌 土星漢遜酵母
銅綠假單胞菌凍干粉 耐久腸球菌(堅韌鏈球菌)
構巢裸胞殼 保加利亞乳桿菌
沼澤紅假單胞菌 膠紅酵母
細黃鏈霉菌 橄欖包毛殼
干酪乳桿菌干酪亞種 香蕉枯萎病
特異青霉 嗜熱脂肪桿菌ATCC 7953
炭球菌 枯草桿菌黑色變種芽孢菌ATCC 9372
克柔念珠菌凍干粉 嗜熱乳酸鏈球菌AS1.1864凍干粉
OKT11小鼠雜交瘤(抗CD2)細胞立枯多核菌 熏衣草灰鏈霉菌
耐鹽芽孢桿菌 球毛殼
生孢梭菌(產芽孢梭狀芽孢桿菌) 健強地霉
白黃鏈霉菌 地生翅孢殼
泛養副球菌 類干酪乳桿菌類干酪亞種
萄球菌ATCC43300凍干粉 改良馬丁瓊脂培養基70mm
擬康氏木霉 球型芽孢桿菌
操作步驟:
(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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