當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> Smad3抑制劑(SIS3)
貨號 | FS-X10404 |
---|
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱:Smad3抑制劑(SIS3)
英文名稱:SIS3
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg
貨號:FS-X10404
產品介紹:
英文名稱:SIS3 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg SIS3是一個強的和選擇性的Smad3抑制劑,也是強的Nox4啟動子的調節器。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:521984-48-5 純度:98.0% 分子量:489.99 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
Marivita litorea凋亡誘導受體PLEKHG5抗體Anti-Alkaline phosphatase/ALPL Antibody雌激受體(ER)
長雙歧桿菌蛋白質磷2A-B55抗體Anti-ALKBH1 Antibody雌激硫轉移(SULT1E1)
棕櫚酰蛋白水解2抗體Anti-ALKBH5 Antibody雌激(E)
大腸桿菌屬多谷酰結合蛋白1抗體Anti-ALOX12 Antibody雌二受體(ER)
慢生根瘤菌豬藍耳病病抗體Anti-ALOX12 Antibody雌二(E2)
炭疽芽胞桿菌對氧磷3抗體Anti-ALOX15 Antibody(PB0007)垂體腺環化激活肽(PACAP)
嗜冷桿菌屬蛋白質精亞型2抗體Anti-ALOX5 Antibody垂草扁桃(VMA)
杏鮑菇磷乙轉移2抗體Anti-ALOX5 Antibody串珠(HSPG2)
白靈菇磷脂酰肌結合網格蛋白組裝蛋白抗體Anti-ALPL Antibody穿孔/成孔蛋白(PRF1/PFP)
病研所芽孢桿菌絲/蘇蛋白磷1調節亞基10抗體Anti-Alpha B Crystallin/CRYAB Antibody穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)
枯草芽孢桿菌色氧化裝配因子PET112抗體Anti-ALOX5 Antibody穿孔(PF)
泡盛曲霉磷化蛋白激C抗體 PKC εAnti-ALPP Antibody遲現抗原4(VLA4)
靈芝(紅芝, 赤芝)Ⅱ型膠原α1 N端前體肽抗體Anti-AMACR Antibody程序性死亡因子4(PDCD4)
大腸埃希菌腫瘤錯配修復基因PMS1抗體Anti-AMD1 Antibody程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)
褐孢大禿馬勃p400蛋白抗體Anti-AMBP Antibody程序性死亡-1(PD-1)
不動桿菌血小板源性生長因子C抗體Anti-AMBP Antibody成纖維生長因子8(FGF8)
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格:>99%,標準品
小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質量規格:HPLC≥98%,標準品
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:≥98%,BR
Smad3抑制劑(SIS3)史氏芽孢桿 2,5-二苯肼鹽鹽磷化鈣調依賴性蛋白激2
Erwinia persicina 2-溴苯肼鹽鹽紅生成受體
頭狀莖點霉 5-氨基-2-甲輕脂酞輔脫氫
金針菇 Dichlorobis(2-(二苯基膦)乙)釕(II)ATP合成
頂黑毛殼 4-溴-2,3-二甲核因子κB抑制物激
出芽短梗霉(黑酵母) 花生舒緩激肽
大豆慢生根瘤 花生痢疾密螺旋體
釀酒酵母 2,凝血原
檸檬兩面神 5-氟-2-缺氧誘導因子
根霉 高哌唾液淀粉α1
枯草芽孢桿 10-溴癸IIA分泌型磷脂A2
健康皮張抗原(兔皮A) 2,4,6-三氟異苯酯煙酰腺二核
*鎖擲酵母 3-氟-4-(甲氧基羰基)苯20-羥化二十碳四烯
釀酒酵母 2-溴-5-(三氟甲基)吡啶糖原合成激3
陰溝腸桿 4-氨基肉桂乙酯巨噬來源的趨化因子22
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。