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貨號 | FS-X10570 |
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產品介紹:
SKF-96365是SOCE的抑制劑,能夠在結直腸癌細胞里通過引起細胞周期阻滯和凋亡,表現抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:130495-35-1 純度:99.73% 分子量:402.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:SOCE抑制劑
英文名稱:SKF-96365 hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10570
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
皺褶莫氏黑粉菌Snail蛋白抗體Anti-NPM1 Antibody母系蛋白4(MATN4)
費氏中華根瘤菌分泌凋亡相關蛋白1抗體Anti-NPHS2 Antibody母系蛋白3(MATN3)
扭曲毛殼肌動蛋白依賴染色質調控因子SMARCD3蛋白抗體Anti-NPM2 Antibody母系蛋白2(MATN2)
大腸埃希菌線粒體載體腺核轉運蛋白6抗體Anti-NPHS2 Antibody母系蛋白1(MATN1)
鏈格孢Bcl2結合抗凋亡蛋白4抗體Anti-NPPA Antibody墨蝶呤還原(SPR)
糞腸球菌第10號染色體開放閱讀框27抗體Anti-NPM1 Antibody(PB0329)末端脫氧核糖核轉移(DNTT)
擬青霉5-羥色受體2A抗體Anti-NPPA Antibody末端補體復合體C5b-9(C5b-9)
葛藤根瘤菌5-脂氧合抗體Anti-NPPA Antibody膜突蛋白()
赭曲霉SH2B蛋白抗體Anti-NPPB Antibody膜鐵轉運蛋白(FPN)
枯草芽孢桿菌核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體Anti-NPR1 Antibody膜聯蛋白A9(ANXA9)
斯氏土地桿菌磷化類固受體輔助活化因子-3Anti-NPS Antibody膜聯蛋白A8(ANXA8)
毛栓菌磷化血清應答因子抗體Anti-NPY1R Antibody膜聯蛋白A7(ANXA7)
盤長孢狀盤孢SH2結構域轉化蛋白1抗體Anti-NPY Antibody(PB0319)膜聯蛋白A6(ANXA6)
土生叢毛單胞菌磷化SH2結構域轉化蛋白1抗體Anti-NQO1 Antibody膜聯蛋白A5(ANXA5)
磷化SH2結構域轉化蛋白1抗體Anti-NR1H2 Antibody膜聯蛋白A4(ANXA4)
聚酵芽孢桿菌磷化SH2結構域轉化蛋白1抗體Anti-NR1H3 Antibody膜聯蛋白A3(ANXA3)
腫瘤/睪丸抗原135抗體Sphingomonasdokdonensis人臍靜脈平滑肌細胞提取物
骨誘導因子抗體Herpetosiphonaurantiacus人腸靜脈內皮細胞提取物
1號染色體開放閱讀框80抗體檸檬泛菌人食管平滑肌細胞提取物
耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體Chryseobacteriumlathyri人胃粘膜上皮細胞提取物
SOCE抑制劑粟酒裂殖酵母 2,5-二溴-3-十二烷基噻吩鈣調磷
光硬皮馬勃 1-芐基-3-活化T核因子
路普康湖冷桿 二氧化硅微管相關蛋白輕鏈3II
指狀青霉 二氧化硅腎損傷因子1
Paraconiothyrium hawaiiense Fmoc-Lys(Dnp)-OH色P450
串珠鐮孢 3--2-氟吡啶氨基
白地霉 (環基)三苯基溴化膦脂肪
耐久腸球 3-(2-氟苯基)-3-氧代-乙酯卵黃生成
科恩根霉 Fmoc-O-磷基-L-酪CD80分子
固氮 -3-乙CD86分子
枯草芽孢桿 四丁基氫氧化,30水Ⅸ
釀酒酵母 順-1,4-二-2-三磷鳥
人參土成對桿 1-叔丁氧羰基-4-甲氨基乙
節桿 2-溴-5-氟3-甲基
枯草芽孢桿 阿齊沙坦λ干擾
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