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貨號(hào)	FS-01S63750

商品介紹：

測(cè)定意義

土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨，土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體，其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失，間接影響氮肥的利用效率。

測(cè)定原理

硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮?dú)猓陨肀贿€原為Fe2+，F(xiàn)e2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物，在510nm處有吸收峰，羥胺還原酶作用于羥胺，使配合物形成量減少，510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：HR土壤羥胺還原酶檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/48樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63750
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操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

β-促脂(βLPH)檢測(cè)試劑盒尖孢鐮刀Guinea pig PKCθ (Protein Kinase C Theta )ELISA Kit

干擾α/β受體(IFNα/βR1)檢測(cè)試劑盒小孔硬孔Guinea pig LIF (Leukemia Inhibitory Factor) ELISA Kit

腺苷環(huán)化9(ADCY9)檢測(cè)試劑盒嗜芽孢桿Guinea pig ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit

腺苷環(huán)化10(ADCY10)檢測(cè)試劑盒黃發(fā)鏈霉Guinea pig RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit

多巴β羥化(DβH)檢測(cè)試劑盒蘇云金芽孢桿Guinea pig EM2 (Endomorphin 2) ELISA Kit

絲裂原激活蛋白激7(MAPK7)檢測(cè)試劑盒旋絲毛殼Guinea pig CNR1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit

肌特異性烯化(MSE)檢測(cè)試劑盒玉米大斑凸臍蠕孢Guinea pig C4 (Complement Component 4) ELISA Kit

蛋白3(PR3)檢測(cè)試劑盒紅緣層孔Guinea pig NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit

絲裂原激活蛋白激11(MAPK11)檢測(cè)試劑盒枯草芽孢桿Guinea pig D2R/DRD2 (Dopamine Receptor D2) ELISA Kit

巨噬幼紅黏附蛋白(MAEA)檢測(cè)試劑盒煙曲霉Guinea pig PRKG1 (Protein Kinase, cGMP Dependent Type I) ELISA Kit

酪羥化(TH)檢測(cè)試劑盒矩圓黑盤孢Guinea pig TFR/CD71 (Transferrin Receptor) ELISA Kit

葡萄糖氧化(GOD)檢測(cè)試劑盒PrauserellaGuinea pig PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit

趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)檢測(cè)試劑盒Pseudomonas huaxiensisGuinea pig TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit

神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)檢測(cè)試劑盒鞘盒屬Guinea pig PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit

親環(huán)D(CYPD)檢測(cè)試劑盒野野村氏Guinea pig SREBP (Sterol Regulatory Element Binding Proteins) ELISA Kit
HR土壤羥胺還原酶檢測(cè)試劑盒微量法血管緊張I 97%1-甲基萘分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC 熒光標(biāo)記磷化腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體IgG

D-酰-D- 99%1-甲基萘 98%Anti-HSP-90 Alpha/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記熱休克蛋白90α抗體IgG

H-精-甘-天冬-絲-OH ≥95% (HPLC)2-甲基萘 97%Anti-HSP-90 Beta /HRP 辣根過氧化物標(biāo)記熱休克蛋白90β抗體IgG

精酰-甘酰-天冬 97%4-氯-2- 98%Anti-CD4/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記CD4抗體IgG

Arg-Phe-Asp-Ser 98%鄰氯 98%Anti-Insulin/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記胰島抗體IgG

D-精鹽鹽 98%鄰硝 99%Anti-PLAU/uPA/FITC 熒光標(biāo)記尿激型纖溶原激活因子抗體IgG

N-乙酰甘 99%對(duì)硝 99%Anti-Plectin/FITC 熒光標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgG

γ-基丁 99%對(duì)硝 standard for GC, ≥99.5% (GC)Anti-PLAUR/uPAR/FITC 熒光標(biāo)記尿激型纖溶原激活因子受體抗體IgG