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IGF-1R/IR抑制劑(BMS-536924)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-23 16:15:47瀏覽次數(shù):182次

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貨號 FS-X10969
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中文名稱:IGF-1R/IR抑制劑(BMS-536924)

英文名稱:BMS-536924

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10969

產(chǎn)品介紹:

BMS-536924是ATP競爭性IGF-1R/IR抑制劑,IC50分別為100nM/73nM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:468740-43-4

純度:98.73%

分子量:479.96

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

新城疫病人肌腱蛋白RBacillus thuringiensis subsp. kurstaki小鼠血管活性腸肽(VIP)

徐家莊鏈霉菌人生長相關(guān)蛋白43Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)

斯氏土地桿菌大鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)

分散泛菌人聚集蛋白Bacillus thuringiensis subsp. ostroniae小鼠αL巖藻糖(AFU)

瓦克青霉人Agouti相關(guān)蛋白Bacillus thuringiensis subsp. shandongiensis小鼠αL巖藻糖(AFU)

污黑腐皮殼人膜輔蛋白Bacillus thuringiensis subsp. pacificus小鼠血管舒緩激肽(BK)

Brenneria rubrifaciens人延伸蛋白ABacillus thuringiensis subsp. sotto小鼠血管舒緩激肽(BK)

釀酒酵母人酰化激蛋白Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠胰島原(PI)

毛頭鬼傘人殺菌性/通透性增加蛋白Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠胰島原(PI)

棘孢新內(nèi)果菌人外基質(zhì)磷糖蛋白Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠抗IgE受體抗體

法氏檸檬桿菌人復(fù)制蛋白ABacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠抗IgE受體抗體

產(chǎn)芽胞梭菌(生胞梭菌)(可訂購)人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠抗IVIgG抗體

短芽孢桿菌人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T活化蛋白Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠抗IVIgG抗體

灰平鏈霉菌人免疫抑制性蛋白Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠抗心肌抗體(AMA)

褐單梗曲霉人麥角蛋白IgABacillus thuringiensis subsp. thuringiensis小鼠抗心肌抗體(AMA)

泡盛曲霉人發(fā)動蛋白2Bacillus thuringiensis subsp. tianmensis小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)

抑癌基因NDRG3抗體小白臍傘犬腎細(xì)胞系/野生型

有絲分裂氧化1抗體果瘡痂芽枝霉荷蘭黑白花奶牛牛肺細(xì)胞

細(xì)胞粘附分子CD112抗體擬隱孢殼獼猴肌肉細(xì)胞

神經(jīng)母細(xì)胞瘤抑瘤蛋白1抗體氈狀金孢霉小耳豬肺細(xì)胞
IGF-1R/IR抑制劑(BMS-536924)粉虱座殼孢 Sinoacutine酰基氧化

灰葡萄孢 Luteosporin3-羥酰脫氫

大腸埃希氏 Syrosingopine脯脫氫

根癌土壤桿 Pterosin D補(bǔ)體B因子

Marisediminicola Pterosin Z甘露糖結(jié)合蛋白;甘露糖結(jié)合凝集

黑木耳 Glucosyringic acid蛋白磷1

詹氏桿 Cajanin可溶性谷草轉(zhuǎn)氨

枯草芽孢桿 Kaempferol 3-neohesperidoside煙酰腺二核

北方棲低境 Sideroxylin還原型輔Ⅰ

假諾卡氏 Psoracorylifol C前列腺E3

豬丹絲 Inulanolide A球蛋白

美味側(cè)耳 1,2,3,4-Tetrahydronorharman-1-one繆勒管抑制物質(zhì);抗繆勒管

芽孢桿屬 Thunalbene角鯊烯環(huán)氧化

脫硫戈登氏 Cathayanon I14-α去甲基化

釀酒酵母 Toddacoumaquinoneβ-1,3葡聚糖合成

 


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