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| 貨號 | FS-X10243 |
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產品介紹:
英文名稱：Cisplatin 產品規格：50mg Cisplatin 是一種無機的水溶性的鉑配合物，通過形成DNA 交聯劑抑制DNA 合成。 Cisplatin 通過與DNA 相互作用形成DNA 交聯劑誘導細胞毒性，激活多條信號轉導通路, 包括Erk, p53, p73, 和MAPK,其中對激活凋亡影響大。Cisplatin (30 mM)處理HeLa 細胞6小時，顯著激活Erk，持續到隨后的14個小時期間。Cisplatin 還具有有效的抗腫瘤活性，誘導腫瘤細胞死亡。Cisplatin 可引起腎小管上皮細胞（RPTC）發生細胞凋亡，引起細胞收縮，使caspase 3活性提高50倍，磷脂酰絲氨suan外翻提高4倍，染色質凝集和DNA 倍性分別提高5 和15倍。Cisplatin (800 μM)處理RPTC 4個小時，產生細胞壞死的典型特征。 別名：cisplatinum, CDDP, Platinol and Platinol-AQ ：15663-27-1 分子式：Cl2H6N2Pt 分子量：300.05 儲存：-20℃，有效期36個月 |
中文名稱：Cisplatin (DNA交聯劑/細胞凋亡誘導劑)
英文名稱：Cisplatin
產品規格：50mg
貨號：FS-X10243
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
釀酒酵母乙酰化組蛋白H2B抗體Human SLC38A1 大鼠KI-67 免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌乙酰化組蛋白H2B抗體Human SLC25A34 大鼠Kelch樣ECH相關蛋白1(KEAP1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化組蛋白H2AX抗體Human SLC25A33 大鼠I型膠原(COL1)免疫試劑盒
平田頭菇6-2磷化熱休克蛋白27抗體Human SLC25A45 大鼠II型角蛋白,骨架71(KRT71)免疫試劑盒
藤黃毛殼磷化熱休克蛋白70抗體Human ATP6AP2(Renin receptor) 大鼠G蛋白偶聯膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒
焦曲霉磷化熱休克因子1抗體Human SLC27A2 大鼠GTP KRas 免疫試劑盒
釀酒酵母磷化熱休克因子1抗體Human SLC25A46 大鼠Ghrelin受體(Ghsr)免疫試劑盒
雜色云芝磷化熱休克蛋白70抗體Human SLC27A3 大鼠GATA結合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒
桔青霉E3泛蛋白連接HACE1抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) 大鼠F-肌動蛋白免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌結節性硬化癥蛋白1抗體Human SLC22A15 大鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒
松口蘑肝核因子4α抗體Human SLAIN2 大鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化肝核因子4α抗體Human SLAMF7 大鼠FK506結合蛋白12-雷帕霉相關蛋白1(FRAP1)免疫試劑盒
鮑魚側耳淋巴特異性解旋抗體Human SLC10A3 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
竹針孢座囊菌HRAS樣抑制因子2抗體Human SLC12A4 大鼠ERp57 免疫試劑盒
梨多細菌源菌熱休克蛋白家族40抗體Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) 大鼠E3-RSIκB 免疫試劑盒
嗜鹽動性球菌糖蛋白P43抗體Human SLC13A4 大鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規格：10μg/ml,u=5%白樺脂
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質量規格：100μg/ml,u=4%白樺脂
冰島硫化葉菌Sulfolobus│islandicus 質量規格：10μg/ml,u=6%羽扇豆
Cisplatin (DNA交聯劑/細胞凋亡誘導劑)枯草芽孢桿 2-羥基-3-溴-6-磷化α；β水解域包含蛋白5
釀酒酵母 2--3-氟-6-磷化圍脂滴蛋白
立枯絲核 2-溴-6-甲基-3-硝基吡啶堿性磷
韓國靈芝 Boc-DL-乙酰酯
玫瑰栗色鏈霉 四甲基氟化谷脫羧
側耳屬 3-(甲基磺?；?苯基γ-氨基丁轉氨
桿狀毛霉 3-羥基-4,4,4-三氟丁乙酯補體因子D
囊軸發仙囊軸亞種 喹啉-4-磷化腺活化蛋白激
微核鏈霉 3,4,5-三羧苯二單酰
須芒草伯克霍爾德氏 7-羥基庚腎
樣品粉碎機 (-)-二甲基-2,3-鄰異亞基-L-酯周期依賴性激抑制因子1A
產紫青霉 甘氨酰-L-色P4503A4
大腸埃希 2-溴-4-羥基吡啶補體片段
蘑菇 3-硝基鄰苯二卵清蛋白IgG1抗體
Burkholderia anthina 1-氧雜螺[2.5]辛烷-2-甲卵清蛋白IgG2a抗體
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