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服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
豬多殺性巴氏桿菌(SPA)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10290 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
-237℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
2453O1/eltor 稻葉(Inaba)模式菌株: no種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: CM0116生長條件: 37℃
德巴利酵母生長條件: 25-28℃培養基: 13泥土提供形式: 斜面培養物模式菌株: no 真空冷凍干燥法
百日咳博德特氏菌生長條件: 37℃培養基: CM0119提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
ATCC05595=DSM7136培養基: 0002模式菌株: no種屬: Pseudomonas│stutzeri提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母培養基: CM0013制酒精。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
南海海棲菌培養基: 471產酶微生物/產脂肪酶菌株沉積物/深海沉積物提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
-238℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
地衣芽孢桿菌培養基: 33模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 50℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;其他
鏈霉菌培養基: 12模式菌株: no表面土壤提供形式: 其他安全等級: 1生長條件: 28℃ 其他
土星擬威爾酵母土星變種培養基: 0013模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
產堿假單胞菌生長條件: 30℃培養基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
辣椒疫霉培養基: 14模式菌株: no辣椒提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25-30 定期移植法
小孢根霉華變種生長條件: 25-28℃培養基: 0014提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
-239℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
金黃色葡萄球菌生長條件: 37℃培養基: O525提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: yes 定期移植法
皰肉牛肉粒加入皰肉基礎,配成皰肉培養基
MFB培養基 MFB Medium 李斯特氏菌的選擇性增菌培養
慶大霉素瓊脂 Gentamycin Agar 250克 霍亂弧菌的分離培養
霉菌和酵母菌顯色培養基l霉菌和酵母菌的顯色培養incubationmedia霉菌和酵母菌顯色培養基l霉菌和酵母菌的顯色培養
乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯) 250g 鏈球菌增菌培養
李斯特氏菌顯色培養基配套平皿 Listera Chromogenic Medium Dish 9㎝/塊
金黃色葡萄球菌顯色培養基 Staphylococcus Chromogenic Medium 1升 金黃色葡萄球菌的顯色培養
金黃色葡萄球菌顯色培養基配套平皿 Staphylococcus Chromogenic Medium Dish 9㎝/塊
霉菌和酵母菌顯色培養基配套平皿 Mould And Yeast Chromogenic Medium Dish 9㎝/塊
豬多殺性巴氏桿菌(SPA)核酸檢測試劑盒美羅培南藥敏紙片規格:10μg/片,20片/瓶用途:用于抗菌藥體外敏感試驗。
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(MYP)規格:多粘菌素B用途:5ml
頭孢曲松藥敏紙片 別名:頭孢三嗪規格:30ug/片,20片/瓶用途:用于藥物體外敏感性試驗
梭菌增菌對照培養基規格:3.8g/100ml/袋用途:培養基適用性實驗
維生素K1規格:1ml用途:添加于PYG液體培養基基礎
木糖-明膠規格:20支用途:用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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