當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T增殖細胞核抗原抗體撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
增殖細胞核抗原抗體撫生ELISA試劑盒 | proliferating cell nuclear antigen antibody | FS-P66123 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
化樣蛋白11抗體(N端)Podoplanin Protein 平足蛋白抗原靈芝 B
大腸癌腫瘤突變蛋白抗體Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “撲克蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白去勞丹堿鹽鹽,四氫堿鹽鹽
絲氨/蘇氨蛋白激酶MARK4抗體Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊腎蛋白1抗原異夏佛塔苷
肽水解酶抗體Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2抗體氨酰膽堿;氯貝膽堿
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 磷化蛋白激酶B抗原(絲氨磷化位點:473)5-羥糠(標準品)
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原茄尼(標準品)
絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病pre-X蛋白抗原(N端)大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病pre-X蛋白抗原(C端)秦皮苷(標準品)
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) 脯氨羥化酶(多肽)秦皮素(標準品)
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬質蛋白酶(抗原)秦皮素
磷化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體Adiponectin 脂聯素(多肽片斷抗原)秦皮素(標準品)
遷移誘導因子5抗體Adipo R1(adiponectin receptor 1) 脂聯素受體-1(抗原)秦皮乙素(標準品)
致癌因抗體Adipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯素受體-2(抗原)秦皮乙素;6,7-二羥;七葉亭
絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體PSAP/PAP peptide 前列腺性磷酶抗原茄尼
MKLN1抗體PSAP/PAP peptide (human) 前列腺性磷酶抗原(人)(標準品)
增殖細胞核抗原抗體撫生ELISA試劑盒Anti-PLAC9 Antibody膜醭畢赤酵母拉丁屬名: Pichia membranifaciens
Anti-PLA2G6 Antibody嗜冷桿菌*用途: 在無機鹽培養中以5mg/l的孔雀石綠為碳源,與1/6LB共代謝培養,2天內孔雀石綠降解率大于60%
Anti-PLAT Antibody白色短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas alba
Anti-PLAU Antibody假單胞菌用途: 可耐受高濃度對硝酚,降解對硝酚,降解率達30%-50%。
Anti-PLAT Antibody蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
Anti-PLAT Antibody擬莖點霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PLAUR Antibody白僵菌用途: 害蟲生物防治
Anti-PLAUR Antibody褐孢大禿馬勃拉丁屬名: Lycoperdon excipuliforme
Anti-PLAUR Antibody多根硬皮馬勃注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PLCB1 Antibody大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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