當前位置:上海撫生實業有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10286 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
黑曲霉生長條件: 28-30℃培養基: CM0077提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
-228℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
煙色擬盤多毛孢培養基: 16模式菌株: no紅樹提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
根瘤菌(檉麻)與檉麻共生固氮模式菌株: no檉麻根瘤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0053生長條件: 28-30℃
美澳型核果褐腐病菌培養基: 14模式菌株: no自然發病果提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 22-25 定期移植法
蘇云金芽孢桿菌生物殺蟲劑模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 2生長條件: 30℃
小單孢菌屬抗細菌;抗金黃色葡萄球菌;抗枯草芽孢桿菌模式菌株: no樹根土提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 35-37C
伊氏錐蟲科研及血清定型模式菌株: no水牛血液提供形式: 其他安全等級: 2培養基: 0生長條件: 37
-229℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
施氏假單胞菌培養基: 33生物轉化微生物/反硝化菌(單菌驗證),可用于生物脫氮研究,去除養殖水體富營養化;產酶微生物/淀粉酶、脂酶(三丁甘油酯)沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
優雅食烷菌培養基: 821有機污染物降解菌/石油烴類降解菌水樣/表層海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
AS1.16殺鱗翅目昆蟲模式菌株: no種屬: Bacillus thuringiensis Berliner提供形式: 凍干管安全等級: 1培養基: 營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。生長條件: 30℃,好氧。
球孢鏈霉菌生長條件: 28℃培養基: 0011提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌產生代謝產物具有抑菌活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 0012生長條件: 28℃
柑桔鏈格孢產生真菌素模式菌株: no枯葉提供形式: 斜面培養物;凍干物安全等級: 1培養基: 14生長條件: 26℃
-230℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
胰胨瓊脂培養基250g魚類細菌病中病原菌的分離培養
m-HPC Agar incubation media m-HPC Agar
短小芽孢桿菌 支/瓶
SorbitolMaconkeyAgarBase
m-GREENYEASTandFUNGIBROTH
超級肉湯 Super Broth 250克 BR
超級瓊脂 Super Agar 250克 BR
TYGPN培養基 TYGPN Medium 250克 BR
印度墨水 Indian ink 100毫升 炭疽桿菌檢測用配套試劑
偽狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒葡萄糖天門冬素培養基規格:250g用途:葡萄糖天門冬素培養基
麥康凱瓊脂3號規格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離、培養
結晶紫規格:25g用途:微生物指示劑
酚紅煌綠瓊脂規格:250g用途:用于飼料中沙門氏菌分離培養
苦杏仁甙規格:20支詳情介紹
L型細菌高滲鹽增菌培養基規格:250g用途:用于L型細菌增菌培養
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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