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AG 490 (JAK抑制劑)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 10:15:17瀏覽次數:236次

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貨號 FS-X10241
AG 490 (JAK抑制劑)正在熱銷的產品:IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 熒光標記白介-18受體β鏈抗體IgG茚三酮,水合 AR,95.0%
IL-19/NG.1/FITC 熒光標記白介-19抗體IgG中性紅 for cell culture,≥90%(HPLC)
IL-20R Alpha/IL20RA/FITC 熒光標記白介20受體α鏈抗體IgG中性紅 in

中文名稱:AG 490 (JAK抑制劑)

英文名稱:Tyrphostin B42

產品規格:5mg

貨號:FS-X10241

產品介紹:

英文名稱:Tyrphostin B42

產品規格:5mg

AG-490 (Tyrphostin B42)是一種EGFR 抑制劑,IC50為0.1 μM,作用于EGFR 比作用于ErbB2選擇性高135倍,對JAK2也有抑制作用,對Lck,Lyn,Btk,Syk 和Src 沒有抑制活性。

分子量:294.30

化學式:C17H14N2O3

:133550-30-8

儲存:-20℃,有效期24個月

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

釀酒酵母人類白抗原G抗體(N端)Human SLCO4C1 大鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)免疫試劑盒

Luteolibacter人類白抗原G抗體(C端)Human SLFNL1 大鼠Tau蛋白免疫試劑盒

埃希氏菌屬缺氧誘導基因95抗體Human SLC43A1 大鼠TAR DNA結合蛋白43(TARDBP)免疫試劑盒

白乳菇泛蛋白連接E2抗體Human SLCO6A1 大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒

高地芽胞桿菌同源盒蛋白HOXC9抗體Human SLC27A3 大鼠Smad7 免疫試劑盒

晦澀小粘束霉環化核調控陽離子通道蛋白亞型2/4抗體Human SLC30A6 大鼠Smad1 免疫試劑盒

果生鏈核盤菌轉錄因子HELT蛋白抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) 大鼠SHC轉化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒

云南球蓋菇轉錄因子HES6抗體Human SLC35F2 大鼠S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒

騷動厄氏菌同源盒蛋白H6亞型2抗體Human SLC35A1 大鼠S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒

Sphingomonas phyllosphaerae硫乙酰肝6腦脂轉硫1抗體Human SLC34A2 大鼠Rho相關GTP結合蛋白RhoE 免疫試劑盒

球孢白僵菌神經保護肽HN抗體Human SLC36A4 大鼠Rho鳥交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌大鼠細小病H-1株(H-1)抗體(N端)Human SLC30A6 大鼠Ras相關蛋白Rab-11A 免疫試劑盒

麗齒菌屬透明質合成1抗體Human SLC25A18 大鼠Ras相關C3肉底物1(RAC1)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌缺氧誘導因子3α/HIF-3α抗體Human SLC34A2 大鼠P選擇(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒

黑曲霉缺氧誘導因子脯酰4羥化抗體Human SLC25A15 大鼠P物質受體(SP-R)免疫試劑盒

溶血性曼氏桿菌透明質2/玻璃2抗體Human SLC25A22 大鼠P物質(SP)免疫試劑盒

炭疽芽孢桿菌Bacillus│anthracis 質量規格:分析標準品,99.5%長春質堿

矩圓黑盤孢Melanconium│oblongum Berk. 質量規格:100μg/ml,u=3%文多靈

淡紫擬青霉Paecilomyces│sp. 質量規格:10μg/ml,u=6%(R型)原人參二
AG 490 (JAK抑制劑)球形賴芽孢桿 2-芐基-1-乙his標簽蛋白

蚜蟲莫氏黑粉  2--5-氟磷化環磷腺

金黃色葡萄球 4--N,N-二苯基苯球蛋白A抗體

納西桿屬 2-氨基-5-溴破傷風IgG

金乳牛肝 2-氨基-6-血管生成1

美澳型核果褐腐病 2--5-氟吡啶-3-羧球蛋白G a2

美澳型核果褐腐病 5-氨基-2-溴-3-內質網氨基肽1

門多薩假單胞 2-氨基-3--5-溴吡啶乙酰

蠟樣芽孢桿 溴甲基環戊烷-SH

熱帶假絲酵母 2-氨基-3--5-溴吡啶N-酰

粉紅聚端孢霉 2-基硅氧基-1,3-丁二烯琥珀酰

暗褐色毛霉 4-異硫基苯組蛋白

枯草芽孢桿 6-羥基-3-噠單水合物抗核糖體P蛋白抗體

三葉草根瘤 香葉基酮載脂蛋白E2

杰丁畢赤酵母 5-甲基-3,4-二苯基異噁唑載脂蛋白E4

 


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