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丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 11:19:01瀏覽次數:182次

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貨號 FS-X10316
丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)正在熱銷的產品:Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)/FITC 熒光標記化血小板源性生長因子受體-B抗體IgG草死
Paxillin/FITC 熒光標記樁蛋白Paxillin抗體IgG二烯草
Phospho-Paxillin (Tyr118)/FITC 熒光標記化樁蛋白Paxillin抗體IgG1-溴-3-烷 99%

產品介紹:

英文名稱:pyruvate kinase M2 activator

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

TEPP-46是一種有效的,選擇性的酸激酶M2(pyruvate kinase M2)的激活劑,半數激活濃度AC50值為92nM,對其他PKM1,PKL和PKR作用較小或沒有作用。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1221186-53-3

別名:ML-265

純度:99.35%

分子量:372.46

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)

英文名稱:pyruvate kinase M2 activator

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10316

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

慢生根瘤菌富含亮重復蛋白25抗體Human PAPSS2 髓樣分化因子88(MyD88)

四川散斑殼白介31受體a抗體Human PAR2 髓樣分化蛋白2(MD-2)

中國擬迷孔菌LRSAM1蛋白抗體Human PARD3 髓性核分化抗原(MNDA)

波蘭青霉LIM結構域蛋白1抗體Human PARD6B 髓系觸發受體-1(TREM-1)

叢毛單胞菌乳菌菌體表面蛋白抗體Human PARN 髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG Ab)

日本根霉透明質受體抗體Human PARD3 髓鞘相關糖蛋白(MAG)

香菇白三烯A4水解抗體Human PARP10 (Poly [ADP-ribose] polymerase 10) 髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)

耐熱芽孢芽孢桿菌肝臟X受體抗體Human PAMR1 髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)

異常畢赤酵母溶體蛋白跨膜β4抗體Human PAN2 髓鞘蛋白P0(MPZ)

枯草芽孢桿菌富含亮重復神經元5抗體Human BRCA1(Breast cancer type 1 susceptibility protein) 髓磷脂堿性蛋白(MBP)

蠟狀芽孢桿菌親脂性蛋白B抗體Human PANK1 髓磷脂P2蛋白(PMP2)

芽胞桿菌癌癥亮拉鏈下調因子1抗體Human PANK2 髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)

噬幾丁質菌屬賴酰氧化相關蛋白2抗體Human PAICS(Multifunctional protein ADE2) 髓過氧化物(MPO)

湖泊黃桿菌基膜聚糖蛋白抗體Human PAGE2 性鐵蛋白(AIF)

側孢短小芽胞桿菌李斯特菌溶胞抗體Human PANK3 性神經鞘磷脂(ASM)

少根根霉亮羧基轉移1抗體Human PAIP1 性磷(ACP)

叢毛單胞菌Comamonas│testosteroni 質量規格:>98.0%(GC)(T)人參皂Rb2

嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質量規格:>99.0%(T)人參皂Rb1

海迪茨氏菌Dietzia│maris 質量規格:>98.0%(T)擬人參皂F11
丙酮酸激酶M2激活劑(TEPP-46)大腸埃希氏 1-氟-3-基苯8異前列腺

釀酒酵母 1-戊基-3-氟苯8-異前列腺F2α

擬青霉 4-乙基溴骨I型膠原交聯C端頂端肽

葡萄座腔屬 鄰氨基-N,N-二甲酰Ⅰ型膠原N末端肽

黑附球 5-氨基-2-甲Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽

側孢短芽孢桿 3--5-甲氧基Ⅱ型肺泡表面抗原

總狀共頭霉 2-基Ⅱ型膠原

Lysinibacillus 3,6-二氟鄰苯二甲酐Ⅱ型膠原C端肽

硬結桿 4-羥基-四氟Ⅱ型膠原抗體

異常威克漢姆酵母 2-氨基-5-Ⅲ型膠原

空腸彎曲桿 2-溴-5-氟-3-硝基吡啶Ⅲ型前膠原氨基端肽

高山被孢霉 5-氨甲基-1,3,4-惡二唑-2-甲乙酯鹽鹽Ⅳ型膠原

紫色紅曲 3,4,5,6-四氟鄰苯二甲Agouti相關蛋白

pLVX Tre3G 三乙鹽AKT蛋白

釀酒酵母 3-溴甲AMPA離子能谷受體1

 


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