PCR的反應條件：
因擴增片段的大小、反應體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環次數
根據模板DNA的量以及擴增片段的大小，設定25～30個循環。
如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，則會出現Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預備實驗可2℃間隔進行)。另外，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內設定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時，每kbp大體可設定30秒～1分鐘；當溫度設定在68℃以下時, 時間設定可稍長一些。通常，Anneal溫度太高，有時會得不到擴增產物；Anneal溫度太低時，容易發生非特異性反應。另外，Extension時間太短時，會得不到擴增產物或者會有一些短的非特異性產物優成；而Extension時間太長時，會出現Smear。
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參數規格：
產品名稱：禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒
產品規格：50T
產品貨號：FS-P10258
產品分類：熒光PCR法
產品運輸：低溫運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
定量PCR方法：
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內切酶消化PCR產物，競爭性模板的產物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產物分開，分別測定熒光強度，根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物，擴增產物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗di高辛或生物素酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，最終酶使底物顯色。常規的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內標，作出標準曲線，也可實現定量檢測目的。
實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確，重現性*定量方法，已得到的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
芽孢桿菌培養基: 2模式菌株: no黃瓜花提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法

布雷絲枝霉培養基: 0017模式菌株: no空氣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

產黃青霉培養基: 14啟動子功能的研究提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 15℃ -80℃冰箱凍結法

雙環林地蘑菇可食或有、菌根菌模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: 14生長條件: 25

 -201℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

黃曲霉培養基: CM0015制作醬油麩曲。提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法

靈芝(赤芝，紅靈芝)培養基: CM0017保健、藥用，適合液體發酵。提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法；定期移植法

柴油食烷菌潛在的有機污染物降解菌/分離自石油與PAHs混合物富集菌群；產酶微生物/淀粉酶，脂酶（三丁甘油酯）模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 25℃

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種培養基: 0002殺鱗翅目昆蟲提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

白色假絲酵母菌培養基: CM0013模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 36℃ -80℃冰箱凍結法

 HBUM70109模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養基: 0012生長條件: 28℃

 -202℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

大腸埃希菌研究教學分類模式菌株: no雞肝臟提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 335生長條件: 37

鏈霉菌培養基: 0012模式菌株: no腐殖質土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

黃桿菌污染物降解微生物/潛在石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 25℃

IMI240054=NRRL2771模式菌株模式菌株: yes種屬: Absidia│cylindrospora var. rhizomorpha提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0014生長條件: 25℃

Drosophilamedium

Modified Letheen Broth (AOAC) incubation media Modified Letheen Broth (AOAC)

糙孢曲霉 支/瓶

含225mlGN增菌液均質袋志賀氏菌前增菌培養

葡萄糖蛋白胨培養基 250g 藥品，生物制品無菌試驗

磷鹽葡萄糖蛋白胨水培養基  Phosphate Glucose Peptone Water  250克  甲基紅試驗

KORSER氏檸檬鹽肉湯  Korser Citrate Sodium Broth  100克  細菌的枸櫞鹽試驗

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂  VRBA  250克  大腸菌群的檢驗

SA瓊脂  Salmonella Arizona Agar  250克  亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離
禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒纖維二糖規格：5g用途：每1克本品無菌添加于100ml

馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)規格：250g用途：用于霉菌、酵母菌計數(GB標準)

鞭毛染色液用途：用于細菌鞭毛染色。拉丁屬名：鞭毛染色液

哥倫比亞血瓊脂平板（9cm）規格：10個/包用途：用于營養要求高細菌的分離、培養和溶血試驗

抗生素檢定培養基4號規格：250g用途：用于鹽霉素鈉、莫能菌素及其制劑等效價測定

瓷珠菌種保存管規格：50支/盒用途：用于菌種保存（瓷珠法）