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Aurora A抑制劑(Alisertib)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 11:22:52瀏覽次數:189次

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貨號 FS-X10320
Aurora A抑制劑(Alisertib)正在熱銷的產品:PHD3 /FITC 熒光標記脯氨羥化抗體IgG酰苯 99.8%,升華純化
phospho-FAK(pTyr577)/FITC 熒光標記抗化粘著斑激抗體IgG酰苯 99.95%,升華純化
phospho-JNK1/2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光標記抗化氨末端激1/2抗體IgG莰烯 75%
phospho GA

產品介紹:

英文名稱:Alisertib

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

Alisertib是一種具有選擇性的Aurora A抑制劑,IC50值為1.2nM,對Aurora A的選擇性高于Aurora B。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1028486-01-2

別名:MLN 8237

純度:99.43%

分子量:518.92

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:Aurora A抑制劑(Alisertib)

英文名稱:Alisertib

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10320

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

多主葡萄殼菌低密度脂蛋白受體相關蛋白5抗體Human OVCA1 嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員12(EAR12)

變異鏈霉菌磷化低密度脂蛋白受體相關蛋白5抗體Human OVOL1 嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員1(EAR1)

明尼蘇達被毛孢磷化低密度脂蛋白受體相關蛋白1抗體Human OXA1L 嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)

雙孢蘑菇蘇蛋白激LKB1抗體Human Osteoglycin 嗜環蛋白/親環B(CyPB)

白地霉低分子量蛋白7抗體Human HABP1/C1QBP(Hyaluronan Binding Protein 1) 嗜環蛋白/親環A(CyPA)

郝氏鏈霉菌脂肪瘤相關蛋白抗體Human OXA1L 嗜鉻蛋白A(CgA)

嗜肉考克氏菌層粘連蛋白β4抗體Human OSTF1 嗜肺軍團菌抗原(LP Ag)

巴氏梭菌黃體激釋放激/促性腺激釋放激抗體Human Osteoglycin 視網膜母瘤抑制蛋白(pRB)

大隱球酵母蛋白賴-6-氧化抗體Human ORC5L 視黃誘導基因/RIG-1樣受體(RLR)

糙皮側耳白酪激受體抗體Human ORC6 視黃結合蛋白4(RBP-4)

中慢生華癸根瘤菌同源盒轉錄因子LMX1A抗體Human OS9 視黃結合蛋白4(RBP4)

黑曲霉轉化生長因子β1結合蛋白1抗體Human OSBP 視黃結合蛋白(RBP)

葡萄球菌屬狂躁基因同源蛋白MFNG抗體Human OSBPL10 食欲受體(OXR)

短芽孢桿菌E3泛蛋白連接MIB1抗體Human OSBPL11 食欲/阿立新B(OX-B)

異常威克漢姆酵母主導控制樣蛋白1抗體Human OSBPL2 生長抑(SS)

釀酒酵母主導控制樣蛋白2抗體Human ORAI1 生長相關蛋白43(GAP-43)

沙阿霉鏈霉菌Streptomyces│zaomyceticus 質量規格:用于亞鐵離子的測定諾林

鞘單胞菌Sphingomonas│chlorophenolica 質量規格:>99.0%(HPLC)(T)檸檬苦

酵母屬Saccharomyces│sp. 質量規格:>99.0%(HPLC)(T)土木香內酯
Aurora A抑制劑(Alisertib)北里胞 N-Boc-酪D-乳脫氫

海南根瘤 2-氨基-2',4'-二氟苯乙酮Endoglin

    隆對照液 2-酰E鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白

隆紋黑蛋巢 四氫堿鹽鹽E選擇

福氏志賀氏 三羥甲基烷-三[3-(2-甲基吖啶基)酯]GATA結合蛋白3

釀酒酵母 1-基哌二氫GRO;KC

早熟禾鐮孢 4-環己基嗎啉III型前膠原

黃海海桿狀 1,2-二氟-3-苯IV型膠原

暗擬莖點霉 硝奧昔康唑IX型膠原

水堿 降烯-2,3-二羧基亞基叔丁基碳酯IκB激-β

腐皮鐮孢 4--5-羥基3(2H)-噠I型膠原

曲霉疏展變種 2-氟-4-苯肼鹽鹽I型膠原羥基端肽β降解產物

平臍蠕孢 3-硝基鄰苯二甲酐I型膠原羧基端前肽

鞘氨單胞 5-溴苯酞I型前膠原羧基端肽

Massilia namucuonensis 3-氟甲酯I型前膠原N端前肽

 


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