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貨號 | A01X783 | 規格 | 1×106cells/T25培養瓶 |
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細胞形態 | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
產品名稱 | huh-7人肝癌細胞 | 貨號 | A01X783 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | huh7:huh-7 |
分類 | 人系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | HuH-7 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 男性 |
組織來源 | 肝;肝癌 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
詳情簡介 | 據說,HuH-7細胞可產甲胎蛋白、、血漿銅藍蛋白、纖維蛋白原、纖維粘連蛋白等。 |
生長培養基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
保藏機構 | CCLV; CCLV-RIE 1079 JCRB; JCRB0403 KCB; KCB 200970YJ KCLB; 60104 |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業或科研等非醫療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品:
CD33抗體磷酸化p21激活激酶2抗體 英文名;Phospho-PAK2 (Ser20)
CD344抗體磷酸化p21激活激酶3抗體 英文名;phospho-PAK3 (Ser154)
CD349抗體磷酸化p21激活激酶4抗體 英文名;Phospho-PAK4 (Ser99)
CD34單克隆抗體磷酸化p21激活激酶6抗體 英文名;Phospho-PAK6 (Ser560)
CD34抗體磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑 英文名;phospho-CDKN1B (Ser10)
CD34重組兔單抗磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 英文名;phospho-CDKN1B (Thr157)
CD350抗體磷酸化p38MAPK抗體 英文名;phospho-P38 MAPK (Thr180)
CD351抗體磷酸化p38調節/激活蛋白激酶抗體 英文名;phospho-MAPKAPK5 (Ser93)
CD361抗體磷酸化p53結合蛋白1抗體 英文名;phospho-p53BP1 (Ser25 + Ser29)
CD36抗體磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體 英文名;Phospho-p63 (Ser455)
huh-7人肝癌細胞CD38重組兔單克隆抗體磷酸化PDZ和LIM結構域結合蛋白5抗體 英文名;phospho-PDLIM5 (Tyr251)
CD39/ENTPD1抗體磷酸化PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶抗體 英文名;Phospho-PBK (Thr9)
CD39樣蛋白1抗體磷酸化p-IκB-α抗體 英文名;phospho-IKB alpha (Ser32 + Ser36)
CD39樣蛋白2/ENTPD6抗體磷酸化Rad51抗體 英文名;phospho-RAD51 (Thr309)
CD39重組兔單克隆抗體磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 英文名;phospho-PBP (Ser153)
操作步驟:
(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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